Tesis doctoral de LLuis Espinosa Blay
El epitelio intestinal esta constituido por una monocapa de células que a nivel estructural se organizan formando una serie de invaginaciones i evaginaciones llamadas criptas i villi. Una de las caracteristicas mas importantes de este tejido es su capacidad para regenerarse de forma continuada durante toda la vida del organismo adulto. Los mecanismos que controlan el mantenimiento de la homeostais del sistema aun no se conocen. Con el fin de profundizar en el estudio de estos mecanismos hemos centrado nuestro interes en el aislamiento de transcritos expresados especificamente durante los primeros estadios de la diferenciacion intestinal mucosecretora. Como modelo de la diferenciación hemos utilizado dos lineas celulares establecidas: ht-29 m6(fenotipo mucosecretor) y ht-29(fenotipo indeferenciado) y la estrategia empleada para detectar las secuencias expresadas diferencialmente ha sido la hibridación sustractiva. este trabajo ha dado lugar al aislamiento de 33 cdnas independientes, un tercio de los cuales se expresa diferencialmente en la población mucosecretora, y que corresponden a 4 grandes grupos: proteinas ribosomales, transcritos mitocondriales, transcritos que contienen secuencias repetitivas de la familia alu y transcritos que no pertenecen a ninguno de los grupos anteriores. en este ultimo grupo cabe destacar el clon que codifica para la serin-treonin quinasa emk1, la cual forma parte de un nuevo grupo de quinasas en el que se incluyen par-1,mark1 y 2, y c-tak1. utilizando en paralelo tecnicas de criba de bancos de cdna y race-pcr hemos obtenido la secuencia codificante completa de emk1 y posteriormente hemos caracterizado la estructura del gen. Mediante tecnicas de pcr y por comparacion entre los distintos cdnas de que disponiamos hemos identificado 3 distintas isoformas de la quinasa (emk1a, emk1b y emk1y) y una variante mas (a16), definida por la ausencia del exon 16. Mediante ensayos de spot dot y northern blot hemos
Datos académicos de la tesis doctoral «Deteccio de sequencies marcadores expressades (ests) durant la diferenciacio mucosecretora en les cel.lules ht-29 m6: clonatge i caracterizacio de la ser/tre quinasa humana emk1«
- Título de la tesis: Deteccio de sequencies marcadores expressades (ests) durant la diferenciacio mucosecretora en les cel.lules ht-29 m6: clonatge i caracterizacio de la ser/tre quinasa humana emk1
- Autor: LLuis Espinosa Blay
- Universidad: Barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 03/03/2000
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Estanis Navarro Gomez
- Tribunal
- Presidente del tribunal: manuel Palacín prieto
- david Bueno torres (vocal)
- diego Haro bautista (vocal)
- purificacion Muñoz canoves (vocal)