Tesis doctoral de Fabregas Batlle Pere Jordi
La hipotesis en que se basa el presente trabajo es que el desarrollo y el cancer comparten mecanismos de funcionamiento y que ello es debido a que comparten los genes que los rigen. Se ha diseñado un plan de trabajo dividido en dos fases: 1. Deteccion de genes que se expresan en el periodo fetal de la rata y 2. Estudio de la implicación en el cancer de genes detectados en la primera fase. Esta tesis doctoral tiene como objetivo llevar a cabo la primera parte de este plan de trabajo. El abordaje metodologico se ha realizado de forma secuencial. En primer lugar se ha utilizado la tecnica rna arbitrarily primed pcr (rap-pcr) para detectar secuencias genicas diferencialmente expresadas. Para ello fueron microdisecados segmentos de tubo digestivo abdominal en fetos procedentes de 7 ratas de 17 a 20 dias de gestacion. se efectuo la extracción del arn para posteriormente realizar su conversion a adnc mediante retrotranscripcion. La amplificacion de los adnc se realizó mediante pcr, que en la rap-pcr se caracteriza por la utilización de un solo primer de secuencia aleatoria, una mayor concentracion de sales en la mezcla y bajas temperaturas de anillamiento (50ºc) en los 5 primeros ciclos, obteniendose la amplificacion de multiples secuencias que se disponen en un patrón de bandas cuando se analizan mediante electroforesis en geles de secuenciacion. Diez bandas fueron clonadas y secuenciadas. Las secuencias obtenidas fueron analizadas con el programa blast en las bases de datos de ncbi y ucsc. Finalmente, se realizó la tecnica de la hibridación «in situ» sobre cortes sagitales obtenidos con microtomo de congelacion, de fetos de rata, utilizando ribosondas marcada con digoxigenina, construidas a partir de clones de bacterias que contenian el plasmido con una de las bandas (hsp86). los resultados obtenidos en este trabajo pueden resumirse en tres niveles. 1.Rap-pcr: los patrones de expresión no puede ser considerados como concluyentes p
Datos académicos de la tesis doctoral «Deteccion y estudio de genes implicados en el desarrollo prenatal de la rata«
- Título de la tesis: Deteccion y estudio de genes implicados en el desarrollo prenatal de la rata
- Autor: Fabregas Batlle Pere Jordi
- Universidad: Autónoma de barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 21/11/2001
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Miguel Angel Peinado Morales
- Tribunal
- Presidente del tribunal: José María Domenech mateu
- gabriel Capella munar (vocal)
- rosa Miro ametller (vocal)
- Tomas ferre josep Mª (vocal)