El western blot como herramienta diagnostica en la leishmaniosis cutanea por leishmania (v) paramensis

Tesis doctoral de Agudelo Lopez Sonia Pilar

La leishmaniosis cutanea americana (lca) se presenta en focos muy dispersos que se extienden desde el sur de los estados unidos hasta el norte de argentina. en colombia la lca se distribuye por casi todo el territorio nacional, anualmente se notifican 6500 nuevos casos y la especie del parasito mas ampliamente distribuida es l.Paramensis. El diagnostico de certeza es requisito indispensable para instaurar el tratamiento. El diagnostico parasitologico presenta una sensibilidad menor del 60% y las tecnicas serologicas utilizadas en rutina, ifi y elisa, en muchos casos no detectan las bajas tasas de anticuerpos producidos por los pacientes, de ahí la necesidad de disponer de tecnicas mas sensibles que ayuden a realizar un diagnostico y tratamiento oportuno. El objetivo de este trabajo ha sido determinar la sensibilidad de las diferentes fracciones proteicas reveladas en el western blot (wb) para el diagnostico de la lca por l. Panamensis e identificar los polipeptidos que puedan ser utilizados como marcadores de enfermedad. el antigeno utilizado fue l.Panamansis (mhom/co/87/ua140). Se analizaron 71 sueros de pacientes co lca por l.Panamensis, identificados mediante anticuerpos monoclonales, 21 sueros de personas con serología positiva para la enfermedad de chagas y 40 sueros de personas sanas y prueba de montenegro negativa. La deteccion de anticuerpos se realizó tanto por ifi como por wb. La electroforesis se realizo en minigeles de policrilamida al 15%, como conjugado se utilizo la proteina a peroxidasa y el revelado se hizo con diaminobenzidina-metal. El marcador de pesos moleculares fue de rango bajo biotinilado. el suero de los pacientes con lca revelo en el wb 16 polipeptidos comprendidos entre 14 y 67 kd, con una media de 10 bandas (sd 4.9). Las bandas más sensibles fueron las de 14 y 50 kd (73%), 38 kd(61% y 36 y 34 kd(58%) todas con una especificidad del 100% obtenida a partir de los controles sanos. Las bandas de 28,36,42 y 5

 

Datos académicos de la tesis doctoral «El western blot como herramienta diagnostica en la leishmaniosis cutanea por leishmania (v) paramensis«

  • Título de la tesis:  El western blot como herramienta diagnostica en la leishmaniosis cutanea por leishmania (v) paramensis
  • Autor:  Agudelo Lopez Sonia Pilar
  • Universidad:  Barcelona
  • Fecha de lectura de la tesis:  03/12/1999

 

Dirección y tribunal

  • Director de la tesis
    • Montserrat Portús Vinyeta
  • Tribunal
    • Presidente del tribunal: ignacio Navarrete lópez-cózar
    • carmen Muñoz batet (vocal)
    • josepenric Valladares jose (vocal)
    • montserrat Gallego cullere (vocal)

 

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