Tesis doctoral de Raúl Ruiz Hernández
La molécula de superficie cd31 está implicada en procesos de migración celular a través del endotelio. la expresión de cd31 permite dividir a los linfocitos t cd4 vírgenes y de memoria en 4 poblaciones: 2 poblaciones de linfocitos virgenes cd45ra+ro- (cd31+ y cd31-) y 2 poblaciones de linfocitos de memoria cd45ro+ra- (cd31+ y cd31-). observamos en muestras de sangre periférica de adulto, linfocitos de amígdalas, así como sangre periférica de pacientes vih+ que son positivos para cd31 entre un 60-85% de linfocitos virgenes (cd45ra+ cd27, ccr7 ó cd127 positivos) y un 5-15% de linfocitos de memoria (cd45ro+). la población revertida (cd45ra+ cd27, ccr7 ó cd127 negativas) posee un rango de linfocitos cd31 positivos intermedio (entre 15-85%). por otro lado estudiamos el fenotipo de receptores de quimiocinas de los linfocitos vírgenes cd31+ y cd31- y linfocitos de memoria cd31+ y cd31- en los 3 tipos de muestras anteriores. Observamos 3 perfiles de expresión: el primero contendría a los receptores de quimiocinas homeostáticas cxcr4 y ccr7, que se encuentran entre un 20-90% en todas las poblaciones de cd4, con mayor presencia de estos receptores en las poblaciones cd31 que en las cd31- (10-20% más). El segundo es de los receptores de quimiocinas inflamatorias cxcr3, ccr4, ccr5 y ccr6 y el del receptor homeostático cxcr5, encontrándose principalmente en poblaciones de memoria (10-50%), ya sean cd31+ ó cd31-. el tercero incluye a un 10-20% de la subpoblación de memoria cd31+, que es positiva para los receptores de quimiocinas ccr3 y ccr9, implicados en la migración a mucosas. no encontramos diferencias notables en los porcentajes de linfocitos para cd31 y receptores de quimiocinas entre órganos linfoides y sangre de pacientes vih+ con respecto a los de sangre periférica de donantes control. dado que en el análisis de estas muestras ex vivo observamos una pérdida de la expresión de cd31 en los linfocitos cd4, a medida que las células poseen menos intensidad de expresión de cd45ra y mayor intensidad de cd45ro, quisimos observar esta variación en experimentos in vitro de subpoblaciones aisladas de linfocitos vírgenes ( cd45ra+cd45ro-) cd31+ y cd31- de sangre periférica estimuladas con pha y/ó interleuquinas (il-2, il-7, il-15). sin embargo, la expresión de cd31 no varió. Analizamos si habia diferencias en la proliferación y diferenciación de éstas poblaciones, observando que sólo la población cd31- estimulada con pha necesitó de éstas interleuquinas para adquirir el fenotipo de memoria y diferenciarse. la expresión de cd31 identifica a la población de linfocitos cd4 vírgenes cd45ra+ cd45ro- de sangre periférica denominados emigrantes recientes tímicos. estos linfocitos poseen la mayor parte de los círculos de escisión del receptor de linfocitos t (trecs) presentes en los linfocitos cd4. la capacidad de producir nuevos linfocitos por el timo (funcionalidad tímica) se ha evaluado por la presencia de los trecs en linfocitos de sangre periférica. en los linfocitos cd4 de sangre de cordón es abundante (sobre un 30 % de estos linfocitos) una población con baja expresión de cd45ra y cd45ro (cd45rabajocd45robajo). comprobamos que esta población, al contrario de lo que se postulaba, no es la emigrante reciente tímica, ya que posee menor expresión de cd31 y menor presencia de trecs que la población virgen cd45raaltocd45robajo, mayoritaria en este tipo de muestras. además comprobamos que el porcentaje de linfocitos cd31 positivos en la población cd4 cd45ra+cd45ro- de sangre periférica tanto en controles como en pacientes vih+ y el número de trecs se correlacionan. por tanto, el número de linfocitos cd45ra+cd45ro- cd31+ mediría la capacidad del timo de producir nuevos linfocitos. en pacientes vih+ analizamos la reconstitución inmune de la terapia con la interleuquina 2, utilizada con el fin de incrementar el número de linfocitos cd4. observamos que este aumento sólo ocurre cuando el recuento inicial de linfocitos cd4 es superior a 300 linfocitos/ mm3 en sangre periférica al inicio del tratamiento. el incremento de células incluye linfocitos vírgenes y de memoria. Este aumento va acompañado con un aumento de la respuesta ifn-gamma específicas contra cmv. el contenido de trecs de la población virgen no varia. estos datos sugieren que el tipo de expansión que ocurre durante el tratamiento es tanto de origne tímico como de origen periférico.
Datos académicos de la tesis doctoral «Estudio de la expresión de cd31, isoformas del antígeno leucocitario cd45 y receptores de quimiocinas en linfocitos t cd4: la población cd4 virgen cd31+ como indicador de la reconstitución inmune de origen tímico«
- Título de la tesis: Estudio de la expresión de cd31, isoformas del antígeno leucocitario cd45 y receptores de quimiocinas en linfocitos t cd4: la población cd4 virgen cd31+ como indicador de la reconstitución inmune de origen tímico
- Autor: Raúl Ruiz Hernández
- Universidad: Autónoma de barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 22/01/2009
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Margarita Bofill Soliguer
- Tribunal
- Presidente del tribunal: eva Martínez cáceres
- Julián Miguel Blanco arbués (vocal)
- (vocal)
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