Tesis doctoral de Monica Pons Pons
Las annexinas se caracterizan por su propiedad de unir fosfolípidos dependientemente de ca2+. Mediante tecnicas de inmunofluorescencia indirecta demostramos que en las célulaas nrk la anx6 se encontraba en la región perinuclear en los prelissomas i lisosomas. Dextrano-fitc llegaba al comportamiento anx6 sólo al cabo de 45 min demostrando su localización al final de la via endocítica. En las células polarizadas wif-b solamente un 50% de la anx6 se encontraba en los prelisosomas mientras que el otro 50% se localizó en el golgi. Mediante ensayos in vitro se demostró que la anx6 i la espectrina (citoesqueleto) debian interaccionar para que la calpaina i degradara la espectrina con la subsiguiente internacionalizacion de la vesicula de clatrina. en las celulas nrk la espectrina colonizaba con la anx6 en la región perinuclear y interaccionaba con gst-anx6. Celulas microinyectadas con un mutante de la anx6, el ldl-dii se quedaba acumulado en unas vesículas hinchadas perinucleares. tambien se transfectaron células cho con el mutante de la anx6 mostrando una disminución en la degradación del ldl. Esto nos sugiere que la anx6 tiene un papel importante en la salida de ligandos de los pre-lisosomas para su posterior degradación en los lisosomas. en el estudio del papel de la anx6 en la transducción de señal se utilizaron celulas cho i una linia de cho transfectadas establemente con anx6(choanx6). mediante ensayos de pull down con gst-anx6 demostramos que raf-1 interaccionaba con anx6 independiente del estado d¿estimulacion de las celulas. La actividad raf se encontraba inhibida en las celulas choanx6 y tambien presentaban niveles de ras-gtp mas bajos que las celulas cho, pero curiosamente los niveles de mapk fosforilada eran similares en los tipos celulares, sugiriendonos que en las celulas choanx6 mapk se activa por una via totalmente independiente de ras/raf-1. A pesar de todo, parece ser que la anx6 no es imprescindible ya que l
Datos académicos de la tesis doctoral «Estudio del papel de la annexina 6 en el transporte intracelular. implicacion en la transduccion de senyal«
- Título de la tesis: Estudio del papel de la annexina 6 en el transporte intracelular. implicacion en la transduccion de senyal
- Autor: Monica Pons Pons
- Universidad: Barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 24/04/2001
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Carles Enrich Bastús
- Tribunal
- Presidente del tribunal: roberto Erwin knecht
- francesc Tebar ramon (vocal)
- vicenta Lorente cortes (vocal)
- (vocal)