Tesis doctoral de Inmaculada M. Martinez Vilchez
La alfa-l-fucosidasa es un enzima que hidroliza enlaces glicosídicos entre residuos de fucosa y otros monosacáridos. En guisante se ha purificado una fucosidasa de 20 kda. Nuestros análisis de fraccionamento subcelular yde inmunocitoquímica por microscopia electrónica realizados a partir de diferentes tejidos de guisante demuestran que la fucosidasa es una proteína vacuolar. Experimentos de transcripción/traducción in vitro confirman que la fucosidasa se sintetiza como pre-proproteína con un propéptido carboxi terminal. Esta proteína se expresa de forma estable, procesándose y acumulándose correctamente en las vacuolas de células de arabidopsis transgénicas, en protoplastos transformados transitoriamente de arabidopsis o en las vacuolas de levadura. Mediante el análisis de la acumulación de un conjunto de fucosidasas mutadas, contruidas por delección de aminoácidos carboxi terminales o por mutagénesis dirigda en posibles señales de direccionalidad amino y carboxi terminales, se ha demostrado que el determinante de la direccionalidad vacuolar de esta proteína se encuentra dentro de sus últimos 9 aminoácidos. También se ha demostrado que la fucosidasa llega a la vacuola tras haber pasado por el apt. De golgi y las prevacuolas de almacenamiento. La expresión de la fucosidasa en e. Coli ha permitido comprobar que este enzima sólo es activo si previamente se ha procesado su propéptido carboxi terminal.
Datos académicos de la tesis doctoral «Estudios de expresion y transporte intracelular de una proteina de pisum sativum.«
- Título de la tesis: Estudios de expresion y transporte intracelular de una proteina de pisum sativum.
- Autor: Inmaculada M. Martinez Vilchez
- Universidad: Barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 26/11/1998
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Dolors Ludevid Múgica
- Tribunal
- Presidente del tribunal: albert Bronoat margosa
- José rio Beltan porter (vocal)
- pere Puigdomenech rosell (vocal)
- senen Vilaró coma (vocal)