Tesis doctoral de Tascon Cabrero Ruben Ivan
Se ha desarrollado por primera vez un sistema de mutagenesis por transposon funcional en a pleuropneumoniae utilizando el vector conjugativo suicida plof/km, que porta un mini-tn10. Este sistema permitio obtener dos tipos de mutantes isogenicos afectados en el fenotipo hemolitico: mutantes no hemoliticos, por perdida de la capacidad de produccion de las hemolisinas apxl y apxll, y mutantes debilmente hemoliticos, que solo secretaban la toxina apxll. Ambos tipos de mutantes mantenian su actividad camp positiva, y eran el resultado de inserciones del mini-tn10 en el operon apxl. Hemos utilizado estos mutantes para demostrar inequivocamente que las hemolisinas apxl y apxll son factores de virulencia fundamentales en a. Pleuropneumoniae, y que ambas son necesarias para la maxima expresion de la virulencia. Estas citolisinas son imprescindibles en la produccion del cuadro anatomopatologico caracteristico de la pleuroneumonia aguda, y a nivel celular podrian ejercer un efecto antifagocitico. En funcion de la virulencia en el modelo murino, hemos diferenciado dos grupos dentro de las cepas de a. Pleuropneumoniae estudiadas, cuya respectivas dl50 divergian en al menos un ciclo logaritmico: el de mayor virulencia, formado por las cepas productoras de la hemolisina apxl, y las que causaban una baja mortalidad, que no producian dicha toxina. A. Pleuropneumoniae no reproduce en el raton el cuadro caracteristico de la infeccion natural, y su utilidad para el estudio de la pleuroneumonia estaria circunscrita a la fase aguda. La modificacion del equilibrio ferrico tampoco fue util para mejorar la infeccion causada por a. Pleuropneumoniae en este modelo. la utilizacion de un mutante isogenico ureasa negativo no pudo demostrar la implicacion de esta enzima en el desarrollo de la pleuroneumonia aguda, mas alla de una cierta afectacion en la capacidad de adhesion a celulas hep-2 del mutante.
Datos académicos de la tesis doctoral «Estudios de patogenicidad en actinobacillus pleuropneumoniae.«
- Título de la tesis: Estudios de patogenicidad en actinobacillus pleuropneumoniae.
- Autor: Tascon Cabrero Ruben Ivan
- Universidad: León
- Fecha de lectura de la tesis: 01/01/1995
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Elías Fernando Rodriguez Ferri
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Guillermo Suarez Fernandez
- José Manuel Sánchez-vizcaíno Rodríguez (vocal)
- Santiago Vadillo Machota (vocal)
- José Claudio Pérez Díaz (vocal)