Tesis doctoral de Jesús Rodriguez Diaz
Rotavirus es el principal agente causante de gastroenteritis vírica en niños y animales jóvenes en todo el mundo. Una de las principales proteínas de rotavirus es la glicoproteína no estructural 4 (nsp4) que juega un papel crucial tanto en el ciclo replicativo de rotavirus, actuando como receptor de partículas inmaduras en el retículo endoplasmático, como en la fisiopatología de rotavirus, seindo la primera enterotoxina de origen vírico descrita hasta el momento. El objetivo de la presente tesis fue clonar y producir la glicoporteína nsp4 de diferentes cepas humanas y animales de rotavirus para así poder realizar estudios inmunogénicos tales como la caracterización de epitopos presentes en la proteína y la respuesta inmune que esta proteñina despierta tras la infección por rotavirus. Así mismo nos propusimos estudiar la capacidad que poseen tanto la infección por rotavirus como proteína nsp4 de producir óxido nítrico (on) tanto «in vivo» como «in vitro» y la posible implicación del on en la fisiopatología de rotavirus. se utilizó el sistema de expresión de baculovirus en células de insecto para la producción y purificación de la proteína nsp4 de diferentes cepas de rotavirus humanas y de animales en forma glicosilada y biológicamente activa. Exprerimentos de inmunización de ratones demostraron que los anticuerpos producidos frente a la proteína nsp4 reconocen principalmente el fragmento carobxi-terminal de la proteína (aminoácidos 114 a 175), por lo que esta región es inmunodominante. En la presente tesis se utilizó la tecnología de «phage display» para produc ir anticuerpos monoclonales de simple cadena (scfv) frente a la proteína nsp4. Esta técnica nos permitió aislar scfvs frente a reginones no inmunodominantes de la proteína nsp4. los estudios realizados con sueros de niños convalecientes de una infec ción por rotavirus muestran que la proteína nsp4 provoca una respuesta inmunitaria hum
Datos académicos de la tesis doctoral ««estudios sobre la inmunogenicidad y los mecanismos fisiopatológicos de la proteína nsp4 de rotavirus»«
- Título de la tesis: «estudios sobre la inmunogenicidad y los mecanismos fisiopatológicos de la proteína nsp4 de rotavirus»
- Autor: Jesús Rodriguez Diaz
- Universidad: Universitat de valéncia (estudi general)
- Fecha de lectura de la tesis: 10/06/2005
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Javier Buesa Gómez
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Luis EnJuan es sanchez
- nabil Hlaihel (vocal)
- albert Bosch navarro (vocal)
- María Ruggeri franco (vocal)