Tesis doctoral de Terrada Mayor M. Estela
En los últimos años se han desarrollado metodologías que permiten la expresión en escherichia coli de fragmentos de anticuerpos que pueden tener características semejantes a los anticuerpos completos y mostrar capacidad de unión a un antígeno. Sin embargo, el uso de anticuerpos recombinantes en patología vegetal está en fase muy inicial, aunque puede ofrecer una serie de ventajas como son minimizar el uso de animales para la obtención de anticuerpos, disminuir su coste de producción o mejorar la eficiencia de anticuerpos específicos. en este trabajo se ha pretendido profundizar en la metodología de producción de anticuerpos recombinantes y evaluar las posibilidades de su uso en patología vegetal. para ello, se eligieron como modelo dos anticuerpos monoclonales (amcs) específicos del virus de la tristeza de los cítricos (ctv), dada la importancia económica de esta enfermedad. se han obtenido los anticuerpos recombinantes 3df1scfv y 3ca5scfv a partir de los genes de los amcs 3df1 y 3ca5 y se han expresado en e. Coli como proteínas de fusión con fosfatasa alcalina (aps) o con motivos de dimerización (zip o cl-zip). Los scfvs fusionados a fosfatasa alcalina facilitan la fase de detección en la técnica elisa, mientras que los dímeros scfv-zip o scfv-clzip son capaces de tapizar placas elisa y atrapar antígenos. Así se ha dispuesto de reactivos de fácil aplicación para la detección de ctv en material vegetal mediante elisa. los anticuerpos recombinantes 3df1scfv, 3ca5scfv-aps, 3df1scfv-zip, 3ca5scfv-zip y 3ca5scfv-clzip se han comparado con los amcs 3df1 y 3ca5, observándose que muestran la misma especificidad que los originales. los ensayos elisa-das recombinante realizados con los reactivos 3df1scfv-aps, 3ca5scfv-aps, 3df1scfv-zip y 3ca5scfv-clzip, o la técnica inmunoimpresión-elisa con los reactivos 3df1scfv-aps y 3ca5scfv-aps, han permitido obtener la misma fiabilidad que los estuches
Datos académicos de la tesis doctoral «Expresion y evaluacion de anticuerpos recombinantes especificos del virus de la tristeza de los citricos (ctv).«
- Título de la tesis: Expresion y evaluacion de anticuerpos recombinantes especificos del virus de la tristeza de los citricos (ctv).
- Autor: Terrada Mayor M. Estela
- Universidad: Universitat de valéncia (estudi general)
- Fecha de lectura de la tesis: 01/01/1999
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- María no J. Cambra álvarez
- Tribunal
- Presidente del tribunal: vicente Conejero tomás
- Juan Antonio Garcia alvarez (vocal)
- Antonio Sanz fernandez (vocal)
- Luis EnJuan es (vocal)