Tesis doctoral de Carles Morte Marti
El objetivo general que nos propusimos realizar en esta tesis fue la identificacion y estudio funcional de antigenos membrana de espermatozoide humano involucrados en la respuesta autoinmune. Este objetivo general se puede desglosar en otros mas especificos: 1) estandarizar el metodo de extraccion y manipulacion de proteinas de membrana de espermatozoide humano con el objeto de su posterior caracterizacion bioquimica y funcional. 2) determinar la existencia de antigenos inmunodominantes en la respuesta autoinmune en pacientes infertiles. 3) buscar una estrategia adecuada para el aislamiento de los antigenos inmunodominantes y su caracterizacion funcional. 4) analizar el papel de la fosforilacion de proteinas y presencia de segundos mensajeros en la membrana del espermatozoide en relacion con la capacitacion y la reaccion acrosomica. el sistema de obtencion y extraccion de proteinas de membrana de espermatozoide que ha mostrado ser mas efectivo en cuanto al rendimiento obtenido y a la calidad de las proteinas solubilizadas es: utilizar muestras frescas, sin congelar. Capacitar las celulas en medio f10 suplementado con 3 mg/ml de bsa durante un minimo de 2 horas. Despues de la capacitacion, realizar una seleccion de las celulas moviles mediante la tecnica de «swim-up». utilizar para la extraccion un tampon de solubilizacion con 1% de sds. Despues de la extraccion, reducir la concentracion de sds hasta el 0,1% y adicionar un 1% de triton x100. por primera vez, se ha utilizado la inmunoprecipitacion de extractos proteicos con anticuerpos presentes en suero y plasma seminal de individuos infertiles para la identificacion de autoantigenos involucrados en la respuesta inmune contra espermatozoide. Los pesos moleculares de los antigenos reconocidos por sueros de pacientes infertiles fueron de: 135 kda (reconocido por el 23% de los sueros), 95 kda (23%), 65 kda (62%), 47 kda (77%), 41 kda (50%), 23 (67%). En el caso de los antigenos
Datos académicos de la tesis doctoral «Identificacion y estudio de la funcion de antigenos del espermatozoide humano involucrados en autoinmunidad.«
- Título de la tesis: Identificacion y estudio de la funcion de antigenos del espermatozoide humano involucrados en autoinmunidad.
- Autor: Carles Morte Marti
- Universidad: Autónoma de barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 01/01/1997
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Paz Martinez Ramirez
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Manel Juan Otero
- Jorge Lloberas Cavero (vocal)
- Dolores Jaraquemada Pérez De Guzmán (vocal)
- Juan José Calvete Chornet (vocal)