Tesis doctoral de Vicente Diaz Martinez
En este trabajo se describe la primera aproximación experimental encaminada a la aplicación de una recombinasa perteneciente a la familia de resolvasas/invertasas a la manipulación controlada de genómas eucariotas. Actualmente sólo se dispone de el sistema cre/loxp derivado del bacteriófago p1 perteneciente a la familia int. los datos presentados en esta memoria demuestran que la proteína procariota recombinasa beta puede ser expresada de forma estable y funcional en líneas celulares eucariotas, presentando una gran avidez por el compartimento nuclear y localizándose mayoritariamente en regiones heterocromatínicas. la actividad de la recombinasa beta es capaz de actuar tanto sobre sustratos episómicos como integrados en cromatína y de forma adicional se ha demostrado que la sobreexpresión moderada de la proteína recombinasa beta es compatible con la viavilidad celular. Por encima de unos márgenes parece inducir efectos nocivos. el trabajo también recoge el desarrollo y análisis preliminar del primer modelo de aplicación in vivo. Se han desarrollado líneas de ratones transgénicos que continen integradas en su genóma un número variable de copias de una construcción sustrato y otras líneas transgénicas que sobreexpresan la recombinasa beta específicamente en el timo. Los resultados obtenidos tras el cruce de ambos tipos de animales transgénicos no han permitido, por el momento, demostrar la funcionalidad del sistema in vivo. Asumimos que el principal problema deriva de la integración de los transgenes en zonas transcripcionalmente inactivas, y en consecuencia el trabjo recogido en esta memoria ha abierto nuevas posibilidades de análisis.
Datos académicos de la tesis doctoral «La recombinasa beta del plasmido psm19035 como herramienta para la manipulacion de genomas eucariotas.«
- Título de la tesis: La recombinasa beta del plasmido psm19035 como herramienta para la manipulacion de genomas eucariotas.
- Autor: Vicente Diaz Martinez
- Universidad: Autónoma de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 04/04/2000
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Antonio Bernad Miana
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Francisco Murillo araujo
- angel Ramirez merino (vocal)
- José María Almendral del rio (vocal)
- Jesús Navas méndez (vocal)