Purificacion y caracterizacion del complejo nad(p)h-deshidrogenasa de cloroplastos de cebada (hordeum vulgare l.)

Tesis doctoral de María Eugenia Albacete Lopez Mesas

Existen evidencias de la presencia en cloroplastos de una cadena transportadora de electrones semejante a alguna porcion de la cadena mitocondrial, que contendria un complejo nad(p)h-deshidrogenasa semejante al de mitocondrias. En este trabajo se ha intentado purificar y caracterizar el complejo nad(p) deshidrogenasa de cloroplastos de cebeda. Se inicio el trabajo ensayando la pureza de las preparaciones de cloroplastos y su posible contaminacion por mitocondrias. Unavez comprobada la insignificante contaminacion de cloroplastos por mitocondrias se estudiaron los efectos de distintos detergentes sobre la solubilizacion del enzima, pudiendose observar que desoxicolato ofrecio los mayores rendimientos. Tambien se estudio la lozalizacion subcloroplastica del enzima. Posteriormente se paso a la purificacion del enzima por diversas tecnicas: precipitacion con sulfato anonico, isoelectroenfoque, cromatofrafia mediante la tecnica de fplc en columna ñ y de hidroxilapatito y electroelucion a partir de geles. estos experimentos de purificacion se completaton con electroforeses nativa de las fracciones obtenidas. globlamente considerados los resultados demuestran la existencia en tilacoides de un complejo nad(p)h-deshidrogenasa cloroplastico asociado al enzima ferredoxina-nadp oxido-rreductasa.

 

Datos académicos de la tesis doctoral «Purificacion y caracterizacion del complejo nad(p)h-deshidrogenasa de cloroplastos de cebada (hordeum vulgare l.)«

  • Título de la tesis:  Purificacion y caracterizacion del complejo nad(p)h-deshidrogenasa de cloroplastos de cebada (hordeum vulgare l.)
  • Autor:  María Eugenia Albacete Lopez Mesas
  • Universidad:  Murcia
  • Fecha de lectura de la tesis:  01/01/1996

 

Dirección y tribunal

  • Director de la tesis
    • Juan Coello Moreno
  • Tribunal
    • Presidente del tribunal: Alcaraz Molina Carlos F.
    • Gines Navarro Garcia (vocal)
    • Antonio Cerda Cerda (vocal)
    • Ramon Madrid Vicente (vocal)

 

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