Tesis doctoral de Peña Del Rivero Marcos De La
Se ha identificado una cepa no sintomática (cchmvd-ns) del viroide del moteado clorotico del crisatemo. El analisis de clones de cdna de dicha cepa ha demostrado que son muy similares a los obtenidos de cepas cchmvd-s, aunque otras eran completamente nuevas. Bioensayos en crisantemo mostraron que cdnas de cchmvd-ns eran infecciosos y no sintomaticos. Mediante mutagenesis dirigida se comprobó que la substitución uuuc por gaaa era suficiente para provocar el cambio de fenotipo sintomatico a no sintomatico. Este determinante de patogenicidad el primero de esta clase identificado en un viroide de ribozimas de cabeza de martillo, se localiza en un tetrabucle dentro de la conformacion ramificada predicha para el rna del cchmvd. Además, el analisis de la heterogeneidadde secuencia encontrada en variantes del cchmvd confirma la existencia de dicha conformacion in vivo, lo que demuestra que la estructura secundaria de tipo varilla no es un paradigma universal para los viroides. Tambien se realizo un estudio detallado de este determinante de patogenicidad mediante mutagenesis dirigida, bioensayos y analisis de la progenie resultante. A diferecia de lo observado en otros rnas, el tetrabuble gaaa caracteristico de cepas cchmvd-ns no fue funcionalmente intercambiable por tetra bucles de la familia uncg, lo que sugiere que este motivo esta conservado mas por razones de secuencia que de estructura. En muchos casos, los cambios introducidos terminaron dando lugar a una infeccion sintomatica, aparecio el tetrabucle gaaa de forma mayoritaria en la progenie de las plantas infectadas que ademas mostraron un fenotipo asintomatico. Estos resultados revelan la existencia de dos picos de eficacia para el tetrabucle (uuuc y gaaa). Co-inoculaciones con variantes de cepas (cchmvd-s y ns), mostraron que solo cuando esta ultima se encuentra en un exceso de 100 o 1000 veces, las plantas permanecen asintomaticas, confirmando la mayor eficacia biológica de la variant
Datos académicos de la tesis doctoral «Relaciones estructura-funcion en un viroide con ribozimas de cabeza de martillo«
- Título de la tesis: Relaciones estructura-funcion en un viroide con ribozimas de cabeza de martillo
- Autor: Peña Del Rivero Marcos De La
- Universidad: Universitat de valéncia (estudi general)
- Fecha de lectura de la tesis: 14/12/2001
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Ricardo Flores Pedauye
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Juan Ortin monton
- Francisco Parra fernandez (vocal)
- vicente Pallás benet (vocal)
- agustin Vioque peña (vocal)