Tesis doctoral de Nayra Cardenes Estelles
Structural basis for cbl-induced oligomerization, para su correcto funcionamiento, la célula requiere de un riguroso control de los procesos celulares, por lo que las respuestas a estímulos externos deben estar estrictamente reguladas. La mayoría de receptores de membrana producen señales positivas, y la alteración de la intensidad y duración las mismas provoca cambios en las funciones de la célula. Para asegurar que se alcanzan y mantienen unos niveles adecuados de señalización, existen mecanismos específicos para atenuar rápidamente la transmisión de señales. La internalización o endocitosis de los receptores de membrana es uno de ellos. El factor de crecimiento epidérmico egf y su receptor egfr han sido identificados como componentes clave del proceso de crecimiento y replicación celulares. El aumento en actividad del receptor egfr se ha visto directamente implicado en una serie de tumores sólidos. para llevar a cabo la endocitosis del egfr, se requiere de la formación de un complejo compuesto por endofilinas, la ligasa de ubiquitina cbl y la proteína cin85. Esta última, junto con su homólogo cms, pertenece a una familia de moléculas adaptadoras que contienen tres dominios sh3, una región rica en prolinas y un dominio coiled-coil. cin85 interacciona a través de sus dominios sh3 con la región c-terminal de cbl. Los dominios sh3 comparten un plegamiento conservado de barril-b. Una de las caras de este barril contiene una superficie de unión al ligando relativamente plana y de carácter hidrofóbico que consta de 3 bolsillos poco profundos. Los dominios sh3 reconocen generalmente ligandos ricos en prolinas, de secuencia consenso xpxxp. Los grupos xp del motivo ocupan dos de los bolsillos. El tercero puede hospedar una cadena lateral cargada positivamente, generalmente arginina o usina. El ligando adopta una conformación helicoidal levógira extendida denominada hélice poliprolina-2 (ppii). dependiendo de su orientación relativa respecto al dominio sh3, los ligandos de poliprolinas han sido clasificados como clase i o clase ii. Los de clase i se ajustan al consenso +xfpxfp (siendo + un residuo básico y f uno hidrofóbico) y unen su extremo n-terminal al denominado lazo rt del dominio sh3. En cambio, los de clase ii se caracterizan por el motivo fpxfpx+ uniendo su extremo c-terminal a dicho lazo. Sin embargo, la gran cantidad de dominios sh3 estudiados hasta la fecha ha permitido identificar varios motivos de unión que no corresponden al consenso. La resolución de la estructura del primer dominio sh3 de cin85 (cin85-sh3a) en complejo con un péptido derivado de la secuencia natural de cbl-b incluye un motivo atípico de unión pxxxpr, poniendo de manifiesto un novedoso tipo de reconocimiento para dominios sh3. El complejo es un heterotrímero de dos dominios sh3 unidos al mismo péptido en orientaciones opuestas. Se identificaron en el ligando residuos fundamentales para tanto la heterotrimerización como para la endocitosis y degradación del egfr. Este tipo de reconocimiento supone un nivel inesperado de oligomerización necesario para la regulación negativa del receptor. además, la estructura del complejo de cms-sh3a en complejo con el mismo péptido ha permitido revelar la formación de un heterotrímero que supone un reconocimiento específico del motivo pxxxpr diferente al que ocurre en cin85. El análisis de las interacciones esenciales para la formación de dichos complejos, muestra diferentes residuos fundamentales en cbl-b si la unión es a cin85 o a cms. estos hallazgos han permitido predecir el modo de unión a otros ligandos naturales de cin85. Estos resultados que han sido confirmados con la resolución del complejo de cin85-sh3a:cd2. asimismo, en el presente estudio se pretende descifrar las características esenciales que modulan este tipo de reconocimiento mediante un estudio comparativo con otras estructuras heterotriméricas resueltas posteriormente.
Datos académicos de la tesis doctoral «Structural basis for cbi-induced oligomerization.«
- Título de la tesis: Structural basis for cbi-induced oligomerization.
- Autor: Nayra Cardenes Estelles
- Universidad: Autónoma de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 19/12/2007
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Jerónimo Bravo Sicilia
- Tribunal
- Presidente del tribunal: ignacio Fita rodriguez
- nicolaas a j Van nuland (vocal)
- roger Williams (vocal)
- María Luisa Toribio garcia (vocal)