Tesis doctoral de María Jose Carnicer Rodriguez
La leucemia mieloblástica agua (lma) es un conjunto heterogéneo de enfermedades neoplásicas que se origina como consecuencia de lesiones moleculares que alteran el proceso madurativo normal de los precursores celulares mieloides. clínicamente, la lma comprende una gran variedad de subtipos con morfología celular, pronóstico y diferente respuesta al tratamiento. la aplicación de diferentes metodologías de análisis ha permitido un mejor conocimiento de los proceso hemotopoyéticos normales y de la patogénesis de la leucemia. El hallazgo de ciertas traslocaciones asociadas a determinados tipos de lma con morfología características, ha sido de gran utilidad diagnóstica. Así por ejemplo, la t(8;21)(q22) se asocia al subtipo de lma m2, la inv(16)(p13q22)o la t (16;16)(p13;q2) con el subtipo m4eos y la t(15;17)(q22;q21) con el subtipo m3. Estas entidades determinan un tratamiento especial (ácido transretinoico en la leucemia con t(15;17) o bien definen grupos con distinto riesgo de recaídas; así la lma con t(8;21) o in(16) tendría un buen pronóstico mientras la lma con reordenamientos mll(11q23) se asocia a un mal pronóstico. a pesar de todos estos hallazgos citogenéticos, en aproximadamente el 45% de los pacientes con lma no se detectan alteraciones cromosómicas. Es en este grupo de lma con cariotipo normal donde las técnicas de biología molecular han servido para la identificación de mutaciones en los genes npm1, flt3 y cebpa asociadas a nuevos tipos de lma. en esta tesis, se han planteado las siguientes hipótesis – los factores de transcripción runx1 y cebpa que controlan la hematopoyesis normal se alteran por lesiones genéticas y/o epigenéticas. – es útil el modelo cooperativo para explicar la patogenia de la lma. – algunas de las lesiones moleculares asociadas a lma son reversibles mediante tratamiento farmacológico. los métodos han sido: – diagnóstico de la lma: morfología, citometría y citogenética molecular. – caracterización molecular extensa de la lma con cariotipo normal. Lesiones asociadas en flt3, c-kit, mll y runx1: pcr, rt-pcr y southern blot. – análisis mutacional en runx1, cebpa y meis1: sscp y secuenciación automática. – alteración de los programas de expresión: pcr a tiempo real. – análisis in vitro del efecto de agentes demetilantes y desacetilantes en líneas celulares sobre el ciclo celular, la apoptosis y l reversión del fenotipo leucémico: pcr específica de mutilación, pcr cuantitativa, citometría de flujo y western blot. los resultados obtenido han permitido concluir: – los factores de transcripción runx!, Cebpa que controlan la mielopoyesis normal se alteran mediante mutaciones puntuales. Algunas de estas mutaciones son recurrentes y se producen por mecanismos anormales de recombinación genética. – las lmas cumplen el modelo cooperativo, es decir presentan los dos tipos de mutaciones. En nuestra serie se ha encontrado la coexpresión de: 1) una mutación en fl3 más mutación en runx1, cebpa, cbf -myh11 y reordenamientos del mll y 2) una coexpresión de una mutación en c-kit más runx1-eto o cbf-myh11. – el tratamiento con agentes demetilantes e histonas desacetilasas determina una activación del programa de apoptosis y una reversión parcial del patrón de expresión anómalo en las lma, cbf. – aunque las leucemias con inversión inv(16) y translocación t(8;21) forman parte del mismo grupo de lma, cbf, tienen características biológicas diferentes que pueden influir en la respuesta al tratamiento. – la inestabilidad de microsatélites no es infrecuente en la lma, se asocia a reordenamientos del gen mll, mecanismo molecular de upd y tiene un pronóstico estándar.
Datos académicos de la tesis doctoral «Alteraciones geneticas y epigeneticas en la leucemia mieloblastica aguda«
- Título de la tesis: Alteraciones geneticas y epigeneticas en la leucemia mieloblastica aguda
- Autor: María Jose Carnicer Rodriguez
- Universidad: Barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 17/12/2007
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Josep F. Nomdedeu
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Jorge Sierra
- candido Juarez (vocal)
- dolors Colomer (vocal)
- francesco Lo coco (vocal)