Tesis doctoral de Miguel ángel Sogorb Sánchez
Los dos principales mecanismos de destoxificacion de compuestos organofosforados son la hidrolisis por enzimas denominadas fosfotriesterasas o la union covalente irreversible a carboxilesterasas. Las fosfotriesterasas habian sido detectadas principalmente en mamiferos, siendo indetectables en aves. Trabajos previos habian demostrado la existencia de una actividad fosfotriesterasa que hidrolizaba o-hexil, o-2,5-diclorofenil fosforamidato (hdcp) en pollo y mamiferos. En este trabajo se realizo una caracterizacion bioquimica de la actividad hidrolizante de hdcp (hdcpasa) de suero de pollo y conejo. En el se estudiaron las propiedades cineticas, de respuesta a activadores e inhibidores y se aislo e identifico la actividad hdcpasa por tecnicas cromatograficas. sorprendentemente, la purificacion hasta aparente homogeneidad de la actividad hdcpasa de suero de pollo permitio atribuir esta actividad a la albumina de suero. la actividad hdcpasa copurifico con la actividad hidrolizante de p-nitrofenilbutirato (p-npbasa). albuminas purificadas de suero humano, conejo y bovino y albumina recombinante de suero humano tambien presentaron ambas actividades hdcpasa y p-npbasa no resultaron afectadas por edta y fueron inhibidas por acidos grasos de cadena corta. El sustrato de la hdcpasa inhibio la actividad p-npbasa y viceversa. Estos resultados sugirieron que ambos sustratos son hidrolizados por el mismo centro activo y que este centro activo podria ser el centro de union de acidos grasos a la albumina. el suero de conejo presento dos actividades hdcpasa. Una de ellas sensible y otra resistente a edta. La actividad hdcpasa resistente a edta fue purificada hasta aparente homogeneidad y copurifico con la paraoxonasa resistente al mismo agente quelante y con albumina. Esta fraccion no presento estereoespecifidad en la hidrolisis del hdcp. La fraccion de actividad hdcpasa sensible a edta se asocio (junto con la paraoxanasa sensible a edta) a
Datos académicos de la tesis doctoral «Caracterizacion bioquimica de la actividad hidrolizante de o-hexil, o-2,5-diclorofenil fosforamidato en suero de pollo y conejo.«
- Título de la tesis: Caracterizacion bioquimica de la actividad hidrolizante de o-hexil, o-2,5-diclorofenil fosforamidato en suero de pollo y conejo.
- Autor: Miguel ángel Sogorb Sánchez
- Universidad: Alicante
- Fecha de lectura de la tesis: 01/01/1997
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Eugenio Vilanova Gisbert
- Tribunal
- Presidente del tribunal: José Manuel Gonzalez Ros
- Arturo Ramon Anadon Navarro (vocal)
- Juan Lopez Barea (vocal)
- Antonio Pla Martinez (vocal)