Tesis doctoral de Fernando Sanchez Reus
La caracterizacion de los antigenos mayoritarios del liquido hidatidico se ha realizado mediante electroforesis en geles de poliacrilamida, y se ha valorado su inmunogenicidad por inmunoblot empleando diferentes antisueros humanos. Las proteinas del liquido hidatidico que se han mostrado mas utiles en el inmunodiagnostico son el antigeno 5 y el antigeno b. El antigeno 5 esta constituido por dos polipeptidos de 65 y 56 kda, que tras reduccion dan lugar a una unica banda de 37 kda. El antigeno b esta constituido por diferentes subunidades de aproximadamente 8, 16 y 24 kda, que no modifican su peso molecular en condiciones reductoras. para la obtencion de los antisueros empleados en la inmunolocalizacion, los antigenos parasitarios se han purificado por precipitacion con tampon de baja fuerza ionica y los diferentes polipeptidos se han separado en geles de poliacrilamida. el liquido hidatidico purificado se ha empleado para obtener un antisuero poliespecifico capaz de reconocer los antigenos mayoritarios. Para la obtencion de los antisueros monoespecificos (anti ag 5 y anti ag b) se han empleado las bandas proteicas aisladas que se cortaron del gel y emulsionaron para ser empleadas como inmunogenos. la inmunolocalizacion se ha llevado a cabo en membranas quisticas y protoscolex de procedencia humana. A nivel de la microscopia optica se ha empleado la tecnica del complejo avidina-biotina-peroxidasa y en microscopia electronica una tecnica indirecta de marcaje con oro coloidal. tanto el antigeno 5 como el antigeno b se localizan en areas no contrastadas de la region conectiva de la membrana germinativa y del parenquima parasitario. Mientras que a nivel de los tubulos y en el parenquima de los protoscolex degenerados tan solo se encuentra el antigeno 5. Ninguno de los dos antigenos se localiza en la membrana laminar ni en la region germinal de la membrana germinativa, tampoco en el tegumento, celulas flamigeras, corpusculos
Datos académicos de la tesis doctoral «Caracterizacion, purificacion y localizacion inmunohistoquimica de los antigenos mayoritarios de echinococcus granulosus: antigeno 5 y antigeno b.«
- Título de la tesis: Caracterizacion, purificacion y localizacion inmunohistoquimica de los antigenos mayoritarios de echinococcus granulosus: antigeno 5 y antigeno b.
- Autor: Fernando Sanchez Reus
- Universidad: Autónoma de barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 01/01/1992
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Carme Muñoz Batet
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Guillem Prats Pastor
- Pere Coll Figa (vocal)
- Montserrat Portús Vinyeta (vocal)
- José García Valero (vocal)