Caracterización de bacteriocinas y desarrollo de herramientas genéticas para su producción heteróloga en otras bacterias lácticas (bal) y en las levaduras pichia pastoris, kluyveromyces lactis, hansenula polymorpha y arxula adeninivorans

Tesis doctoral de Juan Borrero Del Pino

Caracterización de bacteriocinas y desarrollo de herramientas genéticas para su producción heteróloga en otras bacterias lácticas (bal) y en las levaduras pichia pastoris, kluyveromyces lactis, hansenula polymorpha y arxula adeninivorans el trabajo realizado ha permitido la caracterización bioquímica y genética de una bacteriocina de 6.004,2 da, denominada garvicina ml (garvml) y producida por lactococcus garvieae dcc43, aislado de ánades reales (anas platyrhynchos). La bacteriocina se sintetiz a como un péptido precursor de 63 aminoácidos con una secuencia líder de 3 aminoácidos que, tras ser eliminada, permite la unión covalente de los aminoácidos de la región n-terminal y c-terminal originando una bacteriocina madura de 60 aminoácidos y estructura circular. La garvml es la primera bacteriocina circular descrita producida por l. Garvieae. Durante el desarrollo de este trabajo también se ha procedido a la caracterización bioquímica y genética de las bacteriocinas producidas por entero coccus faecalis dbh18. Dicha cepa codifica los genes que sintetizan las bacteriocinas enterocina v583 y enterocina l50 (entl50a y entl50b) y dos genes más, similares a entl50a-entl50b y denominados entjsa y entjsb, que sintetizan la bacteriocina ente rocina js (entjsa y entjsb). De los resultados obtenidos se concluye que e. Faecalis dbh18 codifica múltiples bacteriocinas, posiblemente no limitadas a especies determinadas de enterococos ni al origen alimentario, clínico o ambiental de los enteroc ocos que las codifican. La realización de esta tesis también ha permitido el desarrollo y utilización de herramientas genéticas que han permitido la producción heteróloga y expresión funcional de la hiracina jm79 (hirjm79), producida por e. Hirae dch 5, de la enterocina p (entp) producida por e. Faecium p13, y de la enterocina a (enta), producida por e. Faecium t136, por otras bacterias lácticas (bal) y por las levaduras pichia pastoris, kluyveromyces lactis, hansenula polymorpha y arxula adenini nivorans. De gran interés ha sido la utilización de vectores de expresión y la construcción de quimeras génicas que han permitido la clonación, producción y expresión funcional de la enta por las levaduras p. Pastoris x-33ea y k. Lactis gg799ea.

 

Datos académicos de la tesis doctoral «Caracterización de bacteriocinas y desarrollo de herramientas genéticas para su producción heteróloga en otras bacterias lácticas (bal) y en las levaduras pichia pastoris, kluyveromyces lactis, hansenula polymorpha y arxula adeninivorans«

  • Título de la tesis:  Caracterización de bacteriocinas y desarrollo de herramientas genéticas para su producción heteróloga en otras bacterias lácticas (bal) y en las levaduras pichia pastoris, kluyveromyces lactis, hansenula polymorpha y arxula adeninivorans
  • Autor:  Juan Borrero Del Pino
  • Universidad:  Complutense de Madrid
  • Fecha de lectura de la tesis:  08/07/2011

 

Dirección y tribunal

  • Director de la tesis
    • Pablo Hernandez Cruza
  • Tribunal
    • Presidente del tribunal: María del rosario Martín de santos
    • rosa María Del campo moreno (vocal)
    • lorenzo Miguel Pastrana castro (vocal)
    • patricia alexandra Curado quintas dinis poeta (vocal)

 

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