Tesis doctoral de Cristina Gamez Gamez
La gamba es uno de los productos marinos cuyo consumo ha aumentado a lo largo de los últimos años en todo el mundo, al igual que lo han hecho las reacciones alérgicas causadas por el marisco. la alergia al marisco está relacionada con la sensibilización a los ácaros, principalmente mediada por la tropomiosina, el alérgeno mayoritario de las gambas; pero otras proteínas podrían estar involucradas. actualmente, el único tratamiento que existe para la alergia al marisco es evitar su consumo, de ahí el interés de obtener un extracto que pueda emplearse como tratamiento eficaz y seguro. el objetivo principal de este trabajo es la caracterización de las principales proteínas implicadas en las reacciones alérgicas a gamba, identificando nuevos alérgenos de la gamba solenocera melantho, así como el estudio de su implicación en la reactividad cruzada (rc) con el ácaro dermatophagoides pteronyssinus y la obtención de un extracto de gamba hipoalergénico que permita mejorar el tratamiento de la alergia a gamba y de otros mariscos. con este fin se reclutaron pacientes de dos poblaciones de localización geográfica y clima diferentes (Madrid y lugo), los cuales se clasificaron en 3 grupos según los síntomas clínicos: pacientes con síntomas a ácaro y marisco, pacientes sensibilizados sólo a marisco, y sensibilizados sólo a ácaro. además, los pacientes de Madrid se sometieron a pruebas de provocación oral doble ciego controlada con placebo, y según los resultados se clasificaron en pacientes con provocación oral positiva y pacientes que toleraban la gamba. el perfil alergénico de la gamba s. Melantho se estudió mediante inmunodetección. Dicho perfil muestra numerosas proteínas detectadas por más del 50% de la población estudiada. Algunas de estas proteínas se analizaron mediante espectrometría de masas. Se demostró que las nuevas proteínas identificadas eran alérgenos de la gamba s. Melantho mediante ensayos dot-blot con las proteínas purificadas de diferente origen animal. se ha confirmado la implicación de nuevas proteínas en la rc entre la gamba y el ácaro mediante ensayos de inhibición de la inmunodetección. entre los tratamientos empleados para la obtención de un extracto de gamba hipoalergénico, la digestión con pepsina resultó ser eficaz para conseguir un extracto de gamba con reactividad ige reducida. Además, éste extracto de gamba hipoalergénico tenía menor alergenicidad que el extracto de gamba sin digerir, lo cual se verificó mediante pruebas cutáneas y el test de activación de basófilos; siendo estas diferencias estadísticamente significativas. Los ensayos de proliferación de linfocitos t con ambos extractos, demostraron que el extracto hipoalergénico conservaba los epítopos t. También se comprobó que este extracto hipoalergénico era capaz de producir anticuerpos igg en conejos inmunizados con dicho extracto, los cuales eran capaces de inhibir la unión de ige de los pacientes a las proteínas de la gamba. en este trabajo, se identifican 7 proteínas de la gamba s. Melantho, cuatro de las cuales: ¿-actinina, íY-actina, fructosa bifosfato aldolasa y ubiquitina, podrían ser nuevos alérgenos de los crustáceos. Además, se ha demostrado que la ubiquitina, ¿-actinina y la arginina kinasa están implicadas en la rc entre el ácaro y la gamba. se comprueba que la tropomiosina purificada y el extracto de gamba no conservan su capacidad de unir ige tras la digestión con pepsina. además, se demuestra que el extracto hipoalergénico obtenido preserva los epítopos t de las proteínas de la gamba y es capaz de producir anticuerpos igg que bloquean la unión de la ige de los pacientes alérgicos a las proteínas de la gamba. Basándose en estos resultados, el tratamiento con pepsina podría ser un buen método para reducir la alergenicidad de la gamba y así obtener una vacuna efectiva y segura para el tratamiento de la alergia al marisco en general, y de la gamba, en particular.
Datos académicos de la tesis doctoral «Estudio alergénico de la gamba solenocera melantho: identificación de nuevos alergenos y su implicación en la reactividad cruzada con el ácaro dermatophagoides pteronyssinus«
- Título de la tesis: Estudio alergénico de la gamba solenocera melantho: identificación de nuevos alergenos y su implicación en la reactividad cruzada con el ácaro dermatophagoides pteronyssinus
- Autor: Cristina Gamez Gamez
- Universidad: Complutense de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 28/03/2014
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Joaquin Sastre Domínguez
- Tribunal
- Presidente del tribunal: María monica De la fuente del rey
- enrique Fernández-caldas rodríguez (vocal)
- Javier Cuesta herranz (vocal)
- Santiago Quirce gancedo (vocal)