Tesis doctoral de Almudena Ortiz Urquiza
En la última década se ha puesto de manifiesto el interés por añadir entre los criterios de selección de cepas de hongos entomopatógenos (he) para el control de plagas de insectos, normalmente virulencia y óptimos térmicos, el potencial de estas cepas para ser mejoradas biotecnológicamente con objeto de acelerar sus tiempos letales. Diferentes aislados, pertenecientes a la misma especie fúngica, pueden tener diversas estrategias para matar a sus hospedantes, una de ellas la producción de compuestos tóxicos durante la infección fúngica, algunos de los cuales han sido descritos como factores de virulencia en he. Entre éstos están los ya conocidos péptidos cíclicos insecticidas de bajo peso molecular así como las proteínas insecticidas, a las que se ha dedicado hasta la fecha menor atención. En este sentido, es necesario analizar con mayor detalle la secreción in vitro en in vivo de estas proteínas para dilucidar su función en el proceso patogénico de los he, pues constituyen dianas idóneas para la mejora biotecnológica de los mismos. Por otro lado, estas moléculas secretadas por los he pueden ser una nueva fuente de moléculas insecticidas de origen natural, para su empleo en programas de control integrado de plagas. Con objeto de estudiar el papel de estas macromoléculas como factores de virulencia y nuevos insecticidas de origen natural, durante los últimos siete años hemos evaluado la presencia de proteínas insecticidas en los cultivos líquidos de más de 200 aislados de los he beauveria bassiana (bals.) Vuill. Y metarhizium anisopliae (mestch.) Sorok. Los capítulos 4, 5 y 6 del presente trabajo, describen la actividad insecticida por ingestión de la fracción proteínica de extracto bruto (fpeb) de la cepa eama 01/58-su de m. Anisopliae frente a la mosca mediterránea de la fruta ceratitis capitata (wied.), Un tefrítido cuyo control exige urgentemente el uso de insecticidas más respetuosos con el medio ambiente, como los microorganismos entomopatógenos o los compuestos derivados de plantas y microorganismos. El capítulo 4, describe la actividad insecticida crónica por ingestión de esta fpeb secretada en medio líquido de adamek frente c. Capitata. Entonces, en el capítulo 5 mostramos como las fuente de carbono y nitrógeno y la relación entre ellas son importantes en la producción de materia seca, blastosporas y la secreción de proteínas insecticidas por esta cepa, y como mediante la optimización del medio de cultivo, el efecto insecticida de la fpeb puede ser mejorado significativamente, hasta alcanzar un efecto agudo moderado, y causar efectos subletales en la reproducción del tefrítido (capítulo 6). En los capítulos 7 y 8, nos centramos en el papel de los compuestos insecticidas secretados por la cepa eama 01/58-su de m. Anisopliae y por cuatro cepas de b. Bassiana como determinantes de virulencia. Así en el capítulo 7 aportamos datos sobre la acción dual de las proteínas insecticidas secretadas por la mencionada cepa de m. Anisopliae, ya que son activas tanto por ingestión frente a adultos de c. Capitata como por inyección en larvas de galleria mellonella l.. Los estudios realizados in vivo e in vitro revelan que las proteínas responsables de la actividad insecticida observada, que tienen peso molecular aparente de 11 y 15 kda, son secretadas in vivo cuando el hongo crece dentro del insecto y por tanto, podrían jugar un papel fundamental en la estrategia patogénica, al mismo tiempo que pueden conferir virulencia a esta cepa. Finalmente en el capítulo 8, describimos como la secreción de proteínas toxicas está vinculada con la virulencia de las cepas de b. Bassiana evaluadas. Las cepas eabb 01/103-su, eabb 01/12-su y eabb 01/88-su producen proteínas tóxicas in vitro e in vivo, y su virulencia parece estar relacionada con la secreción de tales compuestos durante etapas posteriores a la penetración. Contrariamente, la cepa eama 01/110-su sólo produce proteínas tóxicas in vitro, por lo que su virulencia debe estar asociada a otros compuestos producidos en etapas anteriores (adhesión o penetración).
Datos académicos de la tesis doctoral «Las proteinas secretadas por los hongos entomopatogenos como factores de virulencia y nuevas moleculas insecticidas de origen natural«
- Título de la tesis: Las proteinas secretadas por los hongos entomopatogenos como factores de virulencia y nuevas moleculas insecticidas de origen natural
- Autor: Almudena Ortiz Urquiza
- Universidad: Córdoba
- Fecha de lectura de la tesis: 28/07/2010
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Enrique Quesada Moraga
- Tribunal
- Presidente del tribunal: ramon Albajes garcia
- elisa Viñuela sandoval (vocal)
- josep anton Jacas miret (vocal)
- Antonio Di pietro (vocal)