Tesis doctoral de Bruno Jorge Antunes ColaÁ§o
La ingeniería de tejidos es una ciencia multidisciplinar emergente, que se destaca como una nueva área de la medicina y puede ser definida como el arte de reconstruir los tejidosm, ya sea estructural, o funcionalmente (hunzinker et al., 2001). Dentro de las múltiples células que se pueden utilizar en ingeniería de tejido cartilaginoso, hemos seleccionado trabajar con condrocitos auriculares y células troncales de grasa abdominal, inguinar e infrapatelar. constatamos que los condrocitos auriculares de conejo, cuando se cultivan sobre superficies plásticas se desdiferencian. El fenómeno de desdiferenciación fue descrito por holtzer, en 1960, y en 1977, von der mark, sugirió que este proceso tendría, posiblemente, origen en las interacciones establecidas entre la matriz extracelular (concretamente el colágeno) y los condrocitos. De esta forma, estudiamos la presencia de componentes de la matriz extracelular in situ e in vitro de sus receptores, las integrina.S el cartílago auricular de conejo presenta una colocalización entre los proteoglicanos, colágeno tipo ii y las integrinas beta1, a5, avbeta3, beta3. los cultivos en agregación indujeron la rediferenciación de los condrocitos auriculares de conejo in vitro, con expresión de marcadores de diferenciación como el colágeno tipo ii y el agrecano. El grado de diferenciación es mayor en el centro del agregado, que en la periferia, probablemente debido a la influencia de la hipoxia. constatamos también, que las células en cultivo expresan las integrinas beta1, a5, avbeta3, beta3, pero en menor grado que las células adultas, pudiendo desempeñar un papel en la desdiferenciación que tiene lugar en las superficies plásticas. las células troncales derivadas de tejido adiposo (ctdta) abdominal e inguinal de rata demostraron ser una alternativa viable y bastante prometedora. Conseguimos obtener células en un número bastante aceptable y observamos que a lo largo de los pases éstas se toman en una población más homogénea. Las células eran positivas al cd29 y cd73, aumentando la positividad a estos marcadores con los sucesivos pases, y no alterándose, esta significativamente, con la criopreservación. Estas células tienen capacidad de multipotencia, pudiendo diferenciarse en adipocitos, condrocitos y neuronas. Estas células demostran también capacidad de adhesión al ácido poliglicólico, agar y colágeno tipo i. con el objetivo de profundizar el estudio de la capacidad de diferenciación condrogénica de las células troncales de tejido adiposo, utilizamos el caballo como animal de experimentación, a partir de grasa infrapatelar. Estudiamos la capacidad de diferenciación condrogénica de estas células en diferentes condiciones, intentando comprender el papel de la tensión de oxígeno. Observamos con nuestros experimentos que las ctdta de caballo tienen potencial para diferenciarse en condrocitos, produciendo componentes propios de la matriz extracelular adulta, concretamente colágeno y proteoglicanos. Las condiciones de hipoxia favorecen la expresión precoz de colágeno y proteoglicanos, desempeñando un papel más relevante en el colágeno. La adición de dexametasona conjuntamente con el tgf-beta1, its y ascorbato puede llevar a la creación in vitro, de un modelo de condrocitos hipertróficos. los dos tipos celulares estudiados demostraron ser capaces de producir cartílago in vitro, con expresión de los respectivos marcadores de cartílago. Las ctdta parecen ser una alternativa muy interesante para su elevada capacidad de replicación, lo que permitirá producir mayores cantidad de tejido in vitro.
Datos académicos de la tesis doctoral «Ingeniería del tejido cartilaginoso-obtención de cartílago in vitro para su utilización en ingeniería de tejidos«
- Título de la tesis: Ingeniería del tejido cartilaginoso-obtención de cartílago in vitro para su utilización en ingeniería de tejidos
- Autor: Bruno Jorge Antunes ColaÁ§o
- Universidad: León
- Fecha de lectura de la tesis: 06/06/2008
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Vega Villar Suárez
- Tribunal
- Presidente del tribunal: José gabriel Fernández álvarez
- gracia María Alexandre pires de lopes de melo (vocal)
- Manuel Sarasa barrio (vocal)
- Juan Anguita castillo (vocal)