Tesis doctoral de Omar Fernando Robayo Avendaño
El locus coeruleus (lc) es el principal núcleo noradrenérgico del sistema nervioso central (snc) y proyecta ampliamente a todos los niveles del mismo. Tiene importancia en diversos procesos fisiológicos como el control de ciclo vigilia-sueño (cvs), fenómenos de tolerancia, abstinencia, y antinocicepción. Cabe resaltar que el gato de laboratorio es la especie donde se ha concentrado la mayor parte de los esfuerzos en el estudio del control del cvs. Respecto a la modulación opioide de este fenómeno, se ha demostrado que la activación de receptores opioides en el lc, produce alteraciones del cvs que se manifiestan a su vez como fenómenos de tolerancia a estas sustancias. A pesar de lo importante que resultaría conocer la distribución subcelular de estos receptores en el lc del gato, para explicar estos fenómenos, esto es algo que no se había estudiado antes de esta tesis. Es por esta razón, que se planteó como objetivo estudiar la distribución subcelular de los receptores opioides mu (mor) y delta (dor) en el lc del gato, las relaciones intercelulares entre los sitios de activación de los mismos y su relación con las neuronas noradrenérgicas y gabaérgicas presentes en esta estructura. Para ello se utilizaron secciones del tronco del encéfalo de gatos de laboratorio que contenían el locus coeruleus, las cuales fueron procesadas con inmunohistoquímica doble para gaba o tiroxina hidroxilasa (th, detección de perfiles noradrenérgicos) y receptores opiodes mor o dor. Posteriormente el tejido se procesó para microscopía electrónica, para su análisis ultraestructural cuantificando aquellos perfiles que presentaban las diferentes posibilidades de marcaje. Además, se cuantificaron las relaciones que establecían estos perfiles con otros perfiles (contactos sinápticos, contactos sin presencia de sinapsis, tipo de sinapsis), la ubicación del marcaje para receptores opioides respecto a la membrana celular y la presencia de vesículas grandes de centro denso (ldcv) en los terminales que presentaban el marcaje o estaban en contacto con perfiles inmunomarcados. la inmunorreactividad para th se localizó especialmente en perfiles postsinápticos (dendritas y somas). Los perfiles inmunomarcados para gaba fueron presinpáticos (terminales y axones) y los receptores opioides se localizaron en perfiles postsinápticos y células gliales. La mayoría de la inmunorreactividad doble observada ocurrió en perfiles postsinápticos inmunorreactivos para th y receptores opioides. Los perfiles noradrenérgicos presentaron de forma predominante inmunorreactividad para mor o dor. Por otra parte aproximadamente la mitad de los perfiles postsinápticos inmunorreactivos para receptores opioides eran noradrenérgicos. Como era de esperarse de acuerdo a la distribución de los perfiles gabaérgicos, la mayoría de los mismos no expresaban receptores y de los pocos terminales que los expresaron aproximadamente la mitad eran gabaérgicos. Los contactos axodendríticos fueron los más frecuentes. De estos, los más comunes fueron aquellos provenientes de terminales sin marcaje o terminales gabaérgicos sin expresión de receptores opioides con dendritas inmunorreactivas para receptores opioides. Se observó también que la inmunorreactividad para dor se localizó preferentemente en el compartimiento intracitoplasmático, mientras que la inmmunorreactividad mor tenía preferencia por la membrana plasmática. Respecto a las ldcv se encontró que aproximadamente la mitad de los terminales que presentaban estas vesículas establecían contacto con perfiles inmunorreactivos para dor y mor. Podemos concluir por lo tanto, que mor y dor en el lc del gato de laboratorio tienen una distribución predominante en perfiles postsinápticos. Gran parte de estos receptores se expresan en neuronas noradrenérgicas lo que ayuda a explicar los efectos en el cvs observados por otros investigadores tras la aplicación local de sustancias antagonistas opioides. Mor se expresa con mayor frecuencia en la superficie celular y debido a la gran similitud entre su distribución y la de dor es posible que ambos coexistan en los mismos perfiles. Esto facilitaría la formación de formas heterodímeras algo que ayudaría a explicar los fenómenos de tolerancia observados en los gatos estudiados con inyecciones locales de agonistas opioides. La pequeña población de neuronas gabaérgicas que co-localizan con receptores opioides pueden tener importancia en aspectos fisiológicos donde fenómenos de desinhibición son importantes. La observación de mor y dor en perfiles gliales sugiere que estas sustancias pueden modular la actividad glial y a su vez modular la actividad neuronal por mecanismos similares a la sinapsis tripartita.
Datos académicos de la tesis doctoral «Distribución subcelular de receptores mu y delta en perfiles noradrenérgicos y gabaérgicos del locus coeruleus del gato. implicaciones en la regulación del ciclo vigilia-sueño«
- Título de la tesis: Distribución subcelular de receptores mu y delta en perfiles noradrenérgicos y gabaérgicos del locus coeruleus del gato. implicaciones en la regulación del ciclo vigilia-sueño
- Autor: Omar Fernando Robayo Avendaño
- Universidad: Autónoma de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 01/12/2010
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Miguel Garzón García
- Tribunal
- Presidente del tribunal: isabel trinidad De Andrés de la calle
- Fernando Reinoso suaréz (vocal)
- José julio Rodriguez arellano (vocal)
- María Luisa Laorden carrasco (vocal)