Tesis doctoral de Mariona Rius Mas
Se ha desarrollado una metodología de hibridación genómica comparada (cgh) rápida, en la que el tiempo de hibridación se ha reducido de 72 horas a 12 horas. dicha técnica, aplicada al diagnóstico genético preimplantacional (dgp) ofrece un análisis completo de todos los cromosomas y permite obtener los resultados de forma mucho más rápida y con la misma eficiencia que la obtenida mediante la cgh convencional, de modo que los embriones cromosómicamente normales seleccionados pueden ser transferidos en el mismo ciclo de fecundación in vitro (fiv), evitando su criopreservación. para su puesta a punto, se han analizado 32 fibroblastos aislados de líneas celulares establecidas (coriel) con alteraciones cromosómicas conocidas. una vez desarrollado el protocolo de la cgh rápida, se ha adaptado y validado para el análisis de blastómeros, utilizando embriones descartados de casos de dgp mediante hibridación in situ fluorescente (fish) con nueve sondas para los cromosomas 13, 15, 16, 17, 18, 21, 22, x e y (fish-9-cr). Dicho análisis ha puesto de manifiesto que las discordancias entre los resultados de la cgh rápida y la fish-9-cr son debidas principalmente a la existencia de mosaicismo, pero también a errores de la fish. la cgh rápida también ha sido utilizada para el análisis de 22 embriones de pacientes con edad materna avanzada descartados del dgp mediante fish-9-cr. Este estudio ha revelado la presencia de aneuploidías (el 38,5% de las cuales no detectables mediante fish) y alteraciones estructurales (en el 31,8% de los embriones), así como mosaicismo (77,3%) en los diferentes blastómeros analizados. habiendo demostrado su fiabilidad, la técnica se ha aplicado clínicamente para el cribaje de aneuploidías en dos casos de edad materna avanzada, dos casos de abortos de repetición y un caso de fallos de implantación, obteniendo una tasa de implantación del 60%. previa comprobación de que la cgh rápida era capaz de detectar desequilibrios parciales de cromosomas con un límite de resolución de 10-20mb, esta metodología se ha aplicado en el dgp de portadores de translocaciones cromosómicas robertonianas (tres casos, cuatro ciclos de fiv-dgp), recíprocas (dos casos, tres ciclos de fiv-dgp) y un caso de una doble translocación (tres ciclos de fiv-dgp), consiguiendo un elevado éxito de diagnóstico y dos embarazos. la cgh rápida representa una técnica muy útil para el dgp de casos de portadores translocaciones, ya que permite estudiar la segregación de la reorganización a la vez que el resto de los cromosomas de la célula. Por tanto, su implementación puede incrementar la tasa de implantación de los embriones seleccionados y transferidos en el dgp.
Datos académicos de la tesis doctoral «Hibridació genómica comparada rÁ pida: aplicació al diagnóstic genétic preimplantacional«
- Título de la tesis: Hibridació genómica comparada rÁ pida: aplicació al diagnóstic genétic preimplantacional
- Autor: Mariona Rius Mas
- Universidad: Autónoma de barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 16/12/2010
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Joaquima Navarro Ferreté
- Tribunal
- Presidente del tribunal: francesca Vidal domínguez
- ricard Vidal bosch (vocal)
- (vocal)
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