Kinetic studies of a xyloglucan endotransglycosylase, a key enzime in plant cell morphogenesis

Tesis doctoral de Marc Saura Valls

El presente trabajo de investigación se enmarca en un proyecto europeo llamado e.D.E.N. (Enzyme discovery in hybrid aspen for fibre engineering, qlk5-ct-2001-00443), el objetivo del cual es la identificación de nuevos enzimas vegetales para entender con mayor profundidad los procesos de formación y modificación de las fibras vegetales para abordar en el futuro la mejora de los parámetros de calidad de estas fibras, mediante la generación de líneas transgénicas de plantas. En el presente proyecto se pretende profundizar en el conocimiento de las xiloglucano endotransglicosilasas (xet), enzimas claves en la construcción y modificación controlada de la red de xiloglucano-celulosa, estudiando su mecanismo de acción y su especificidad por sustrato. En este trabajo se estudia una xet de populus tremula x tremuloides, concretamente la xet16a (ptt-xet16a). se diseña y se valida un nuevo ensayo enzimático mediante electroforesis capilar (hpce), que permite el estudio cinético de las xet, utilizando oligosacáridos de xiloglucano de bajo peso molecular y de estructura conocida como sustratos. Estos sustratos han estado sintetizados en el presente trabajo y también por el equipo del dr. Driguez en el cermav-cnrs. se determina que el máximo de actividad de la ptt-xet16a se da entre ph 5 y 5.5 y entre 30 y 40 ºc. Se demuestra que este enzima actúa mediante un mecanismo cinético bi-bi ping-pong, en el que el aceptor actúa como inhibidor competitivo del dador uniéndose al enzima libre y en el que, dependiendo del dador utilizado , éste también puede actuar como inhibidor competitivo del aceptor uniéndose en los subsitios positivos del intermedio glicosilo-enzima y dando diferentes reacciones secundarias como son la polimerización del dador o la elongación del producto, solamente si el dador presenta un grupo glucosilo en el extremo no reductor. se evalúa una librería de xilogluco-oligosacáridos sintetizada por el equipo del dr. Driguez en el cerm

 

Datos académicos de la tesis doctoral «Kinetic studies of a xyloglucan endotransglycosylase, a key enzime in plant cell morphogenesis«

  • Título de la tesis:  Kinetic studies of a xyloglucan endotransglycosylase, a key enzime in plant cell morphogenesis
  • Autor:  Marc Saura Valls
  • Universidad:  Ramón llull
  • Fecha de lectura de la tesis:  28/09/2007

 

Dirección y tribunal

  • Director de la tesis
    • Antonio Planas Sauter
  • Tribunal
    • Presidente del tribunal: Santiago Nonell marrugat
    • Manuel Martin lomas (vocal)
    • hugues Driguez (vocal)
    • joan carles Ferrer artigas (vocal)

 

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