Tesis doctoral de María José Adserias Garriga
Objetivo: puesta a punto de un método de diagnóstico molecular para patógenos periodontales que pueda dar servicio a la clínica odontológica universitaria. material: medio agar-sangre y heart brain infusion, cámara de anaerobiosis, microscopía de fluorescencia, live/dead bacligth bacterial viability kit l-07007, termociclador mj research, eppendorfs, puntas de papel, pipetas, fuente y cubetas de electroforesis. método: para la puesta a punto de este método de diagnóstico molecular se realizaron controles positivos con cepas atcc de los diferentes microorganismos propuestos: p. Gingivalis, p. Intermedia, h. Actynomicetemcomitans, p. Micros, t. Forsythensis y f. Nucleatum. Los cuales fueron crecidos en condiciones de anaerobiosis, para proceder a la extracción del dna (se probaron 3 métodos de extracción: a, b y c. El método a es un método propio mientras que los otros dos han sido propuestos por distintos autores). Se llevó a cabo pcr del dna de cada microorganismo, y los resultados se visualizaron a través de un análisis electroforético. por otra parte, se recogieron muestras clínicas de pacientes periodontales, a las cuales se extrajo el dna y se analizó mdiante electroforesis en gel de agarosa al 2%. resultados: se han establecido las temperaturas de annealing para los diferentes cebadores propuestos para los distintos microorganismos. Se ha escogido el método a por su buen resultado así como su rapidez y sencillez. Se ha establecido una correlación entre cantidad de bacterias e intensidad de bandas, lo que permite una determinación semicuantitativa. La sensibilidad e especificidad de las reacciones ha sido comprobada, con valores, en muchos casos, superiores a los reportados por otros autores. La amplificación también se produce en muestras clínicas más complejas y con baja cantidad de células. Los resultados diagnósticos obtenidos para los pacientes periodontales fueron comparados con los obtenidos en dos empresas de análi
Datos académicos de la tesis doctoral ««detección molecular de patógenos periodontales»«
- Título de la tesis: «detección molecular de patógenos periodontales»
- Autor: María José Adserias Garriga
- Universidad: Internacional de catalunya
- Fecha de lectura de la tesis: 11/12/2006
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Clotet Erra Dr. Josep
- Tribunal
- Presidente del tribunal: eduardo Chimenos kí¼stner
- núria Casals farré (vocal)
- Basilio monné dr. Juan (vocal)
- García gil dr. Jesús (vocal)