Tesis doctoral de Gouveia Carloto Antonio Manuel
La adp-ribosa libre es un nucleósido difosfoazúcar (ndp-azúcar) que tiene una ribosa con carácter reductor y es tóxico debido a su capacidad de reaccionar de forma no enzimática con cadenas laterales de proteínas. recientemente se ha descrito que es un controlador de algunos canales iónicos. Las adp-ribosa hidrolasas son potenciales agentes protectores que impiden la acumulación intracelular de adp-ribosa. En mamíferos, se conocen dos tipos de enzimas con actividad adp-ribosa hidrolasa: 1,- adp-ribosa pirofosfatasas altamente específicas de baja km (menor 1 um) que de manera dependiente de mg2+ hidrolizan sólo adp-ribosa y el análogo no fisiológico idp-ribosa. 2,- nucleósido difosfoazúcar o difosfoalcohol (ndp-x) pirofosfatasas menos específicas, que además de a(i)dp-ribosa hidrolizan otros sustratos ndp-x no reductores. en esta tesis, describimos que extractos de placenta humana contienen dos adp-ribosa hidrolasas, que fueron caracterizadas tras una purificación de unas 1000 veces. Una de ellas, es una adp-azúcar pirofosfatasa: hidrolizó adp-ribosa, adp-glucosa y adp-manosa, pero no por ejemplo udp-glucosa, a velocidades similares. Se parece a una enzima previamente estudiada en eritrocitos humanos y a la expresada a partir de clones denudt5 humano, pero presenta una km para adp-ribosa 5-20 veces menor (7 um). la otra es una adp-ribosa pirofosfatasa altamente específica de baja km (0,4 um), siendo la primera enzima de estas características identificada en tejidos humanos. La enzima recombinante humana nudt9, estudiada tras su expresión en e.Coli, presentó propiedades similares a las de la adp-ribosa pirofosfatasa de placenta, incluyendo el bajo valor de km, lo que nos permitió establecer la identidad de ambas enzimas. Al ser incubadas conh2o2, tanto la adp-ribosa pirofosfatasa purificada de placenta como nudt9 presentaron una parente «cambio de especificidad de catión». La actividad de la enzima en presencia de mg2+ 5m
Datos académicos de la tesis doctoral «Adp-ribosa hidrolasas humanas«
- Título de la tesis: Adp-ribosa hidrolasas humanas
- Autor: Gouveia Carloto Antonio Manuel
- Universidad: Extremadura
- Fecha de lectura de la tesis: 24/10/2005
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Meireles Da Silva GonÁ§alves Ribeiro Joao Nuno
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Antonio Sillero repullo
- Javier Pozueta romero (vocal)
- María Vilanova brugués (vocal)
- ascensión Fernández gonzález (vocal)