Tesis doctoral de Estefania Patricia Hernandez Benito
Las plantas han sido utilizadas desde la antigí¼edad como remedios medicinales para curar enfermedades. Actualmente, muchas de ellas son recolectadas por etnobotánicos que investigan los recursos de las mismas como agentes antimicrobianos, antitumorales y su posible acción sobre el sistema inmunológico. Este material vegetal no constituye simplemente un reservorio de principios activos con actividad farmacológica, sino también un gran potencial para transformar los productos, por semisíntesis, en análogos más efectivos. La entrada del virus de la inmunodeficiencia humana (vih) en la célula, es la primera etapa del ciclo de replicación viral y una diana clave en la exploración de nuevos antirretrovirales, la intervención en este proceso, implica tanto a receptores celulares como a ligandos virales, pudiéndose llegar a detener hipotéticamente la infección y muerte celular. El objetivo principal de este trabajo persigue el descubrimiento, obtención y caracterización de nuevos compuestos naturales de origen vegetal frente a virus, selectivamente frente a vih, y en concreto agentes antivirales dirigidos a etapas tempranas del ciclo de replicación, con baja toxicidad y potencial uso como agentes terapeúticos, microbicidas. Las tres especies vegetales, satureja boliviana lamiaceae, phoradendron crassifolium loranthaceae, y tuberaria lignosa cistaceae, fueron recolectadas, desecadas y molturadas convenientemente para establecer las características micrográficas y poder así garantizar su identidad. Mediante extracciones químicas secuénciales, a partir del extracto acuoso, se han obtenido los principales polisacáridos objeto de estudio, seleccionando para su posterior análisis, los de mayor actividad antiviral. Para conseguir nuestros objetivos se han utilizado diferentes métodos de aislamiento, purificación y elucidación estructural, entre ellos cromatografía de exclusión molecular, cromatografía de gases cg em, espectroscopia de ir, y resonancia magnética nuclear rmn. Se ha determinado in vitro, la capacidad antiviral de los extractos de las tres especies, en una batería de virus representativos, virus del herpes simple tipo i vhs 1, virus de la polio, virus de la estomatitis vesicular vsv, y virus de la inmunodeficiencia adquirida vih, así como y de forma simultánea, la citotoxicidad de los mismos, utilizando para ello, líneas celulares y medios de cultivo adecuados. También se ha determinado y ya de forma selectiva, la actividad en vih de las fracciones aisladas y purificadas de cada extracto, escogiendo para ello dos ensayos que miden la capacidad de los polisacáridos de inhibir la entrada del virus en la célula, se trata de los ensayos de inhibición de la infección en trans mediada por células raji dc sign y de neutralización. Asimismo se han realizado ensayos in vitro que determinan la capacidad antiinflamatoria tanto de los extractos, como de las fracciones polisacarídicas aisladas, analizando la capacidad de inhibir los mediadores de la inflamación no y tnfalfa. Los resultados obtenidos nos llevan a concluir que se trata de polisacáridos pécticos, que se unen, posiblemente por interacción electrostática inespecífica, al receptor gp-120, desestructurando la partícula viral, e inactivando su capacidad infecciosa, y además se trata de polisacáridos que modifican a la baja dos citoquinas proinflamatorias muy importantes, y esto indica junto con la baja citotoxicidad protección de la mucosa. Los resultados obtenidos tanto de capacidad antiviral como de capacidad antiinflamatoria, de estos polisacáridos pueden ser de gran interés, en la búsqueda de métodos preventivos para la infección por vía sexual del vih, ya que actualmente no es posible erradicar la infección una vez establecida y se esta abriendo una puerta a estos métodos de prevención de la enfermedad a través de microbicidas, que aplicados de forma tópica sobre las mucosas puedan evitar la infección y sean seguros y eficaces
Datos académicos de la tesis doctoral «Actividad antiviral y antiinflamatoria de plantas medicinales: aislamiento de polisacaridos activos«
- Título de la tesis: Actividad antiviral y antiinflamatoria de plantas medicinales: aislamiento de polisacaridos activos
- Autor: Estefania Patricia Hernandez Benito
- Universidad: Complutense de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 05/06/2014
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Paulina Bermejo Benito
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Juan a Benedi gonzalez
- alicia Prieto orzanco (vocal)
- María teresa Martín lópez (vocal)
- m. teresa Pérez olmeda (vocal)