Tesis doctoral de Sergio Gonzalo Peco
El lipopolisacárido (lps), una endotoxina presente en la pared celular de las bacterias gram negativas, es un agente causal de sepsis. Numerosas alteraciones, incluidas las de la motilidad intestinal, han sido atribuidas al lps, pero todavía no se conocen sus mecanismos intracelulares. El lps activa las proteínas cinasas activadas por mitógenos (mapks). Las mapks son una familia de proteínas cinasas involucradas en procesos celulares como la proliferación, la diferenciación y la muerte celular; y en procesos patológicos como cáncer, la enfermedad inflamatoria intestinal o la sepsis. Las mapks más importantes son la p38, la c-jun-n- terminal cinasa (jnk1/2) y la cinasa regulada por señales extracelulares (erk1/2). los objetivos del presente trabajo experimental fueron: (1) investigar el papel de las mapks (p38, jnk y erk) y cox-2 en los efectos del lps sobre (a) las contracciones inducidas por acetilcolina (ach), prostaglandina e2 (pge2) y kcl en duodeno de conejo, (b) el nivel de estrés oxidativo; (2) estudiar la expresión y localización de la p38, jnk y erk mapks; y (3) estudiar el efecto de la inhibición de las mapks sobre la expresión de la cox-2 en el duodeno de conejos tratados con lps. los conejos se inyectaron con (1) solución salina, (2) lps, (3) sb203580, un inhibidor de la p38, (4) sb203580 + lps, (5) sp600125, un inhibidor de la jnk, (6) sp600125 + lps, (7) u0126, un inhibidor de la erk, (8) u0126 + lps, (9) ns-398, un inhibidor de la cox-2, ó (10) ns-398 + lps. La contractilidad del duodeno se estudió mediante la técnica baño de órganos. El daño oxidativo se cuantificó con los niveles de carbonilos y malondialdehído (mda) + 4-hidroxialquenales (4-hda) en plasma y duodeno. La expresión proteica de las mapks y cox-2 se examinó mediante la técnica de western blotting. Se localizaron las formas activas de las mapks en el duodeno mediante la técnica de inmunohistoquímica. el lps disminuyó las contracciones inducidas por ach, pge2 y kcl y la estimulación eléctrica de campo. El lps incrementó la expresión de la p-p38, p-jnk, p-erk y de la cox-2 y los niveles de carbonilos y de mda + 4-hda. El sb203580, sp600125, u0126 y el ns-398 bloquearon los efectos del lps sobre la contractilidad a ach, pge2, kcl, los niveles de carbonilos y de mda+4-hda, y la expresión de la p38, p-jnk, p-erk y de la cox-2. La p-p38 se localizó en las neuronas del plexo mientérico y en las células musculares del duodeno, la p-jnk sólo en las células musculares del duodeno y la p-erk se localizó principalmente en las neuronas del plexo mientérico del duodeno. en base a estos resultados se puede sugerir que las mapks p38, jnk y erk, así como la cox-2, estarían involucradas en el mecanismo de acción del lps en el intestino.
Datos académicos de la tesis doctoral «Papel de las mapks en los efectos del lps sobre el intestino de conejo«
- Título de la tesis: Papel de las mapks en los efectos del lps sobre el intestino de conejo
- Autor: Sergio Gonzalo Peco
- Universidad: Zaragoza
- Fecha de lectura de la tesis: 07/03/2011
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Laura Grasa López
- Tribunal
- Presidente del tribunal: octavio Alda torrubia
- marcel Jiménez farrerons (vocal)
- ricard Farré martí (vocal)
- dolores Prieto ocejo (vocal)