Tesis doctoral de Mercedes Díaz Mendoza
Una de las plagas de insectos con mayor incidencia económica sobre el cultivo de maíz en el área mediterránea es el taladro del maíz, sesamia nonagrioides (lepidoptera, noctuidae). El maíz transgénico resistente a taladros que expresa un fragmento de la proteína insecticida cry1ab de la bacteria bacillus thuringiensis (bt), comercializado en españa desde 1998, ofrece una alternativa al uso de insecticidas químicos para el control de esta plaga. El mayor problema que puede presentar la tecnología de plantas transgénicas aplicadas al control de plagas es la aparición de insectos resistentes. Las proteasas digestivas de tipo tripsina pueden estar implicadas en la aparición de resistencia, por su papel fundamental en la activación proteolítica de las toxinas cry, y porque pueden ser responsables de su degradación proteolítica. El conocimiento previo de la diversidad de proteasas en s.Nonagrioides y su interacción con cry1ab permitiría identificar los posibles mecanismos de resistencia mediados por proteasas que se pudieran desarrollar en poblaciones de campo. se han purificado cuatro tipsinas (t, tiia, tiib y tiii) a partir de extractos digestivos de larvas de último estadio de s.Nonagrioides mediante cromatografía de afinidad. Los extractos digestivos se separaron en fracciones utilizando una columna de benzamidina-sefarosa 6b. La primera fracción que eluyen de la columna es la de proteínas no retenidas (pnr) que contienen principalmente quimiotripsinas y elastasas. posteriormente eluyen las cuatro tripsinas en diferentes pasos del gradiente de benzamidina. Mediante el estudio de la huella peptídica y la secuencia n-terminal de las tripsinas purificadas se han podido correlacionar las tripsinas activas purificadas con las secuencias de adnc obtenidas anteriormente. Estas tripsinas pertenecen a tres grupos filogenéticos bien diferenciados de secuencias de tripsinas conservadas en lepidópteros, tipos i, ii y iii. Las tripsinas ti y tiia corre
Datos académicos de la tesis doctoral «Proteasas digestivas de tipo tripsina del taladro del maíz, sesamia nonagrioides (lepidoptera:noctuidae): caracterización e interacción con la proteína insecticida cry1ab«
- Título de la tesis: Proteasas digestivas de tipo tripsina del taladro del maíz, sesamia nonagrioides (lepidoptera:noctuidae): caracterización e interacción con la proteína insecticida cry1ab
- Autor: Mercedes Díaz Mendoza
- Universidad: Politécnica de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 16/06/2006
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Félix Ortego Alonso
- Tribunal
- Presidente del tribunal: gabriel Salcedo durán
- flor Budia marigil (vocal)
- Juan Ferre manzanero (vocal)
- gema María Pérez farinós (vocal)