Tesis doctoral de Ma. Irene Vazquez Vazquez
Resumen la carnitina acetiltransferasa (crat) es un enzima intracelular, ubicado en células eucariotas en mitocondrias, peroxisomas y retículo endoplasmático, donde cataliza la conversión reversible de acetil-coa y carnitina en acetilcarnitina y coa libre. este enzima, estudiado en mamíferos, aves y levaduras, es ubicuo y está constituido por unos 600-700 aminoácidos. Mientras que los vertebrados poseen un único gen, que por splicing alternativo da lugar a las isoformas mitocondrial y peroxisomal, otros organismos, como las levaduras, tienen tres genes diferentes. se ha demostrado una alta actividad crat en el testículo y los espermatozoides de mamífero, y también se conoce que la carnitina es importante en la fertilidad masculina, siendo el fluido epididimario el lugar en el que alcanza una mayor concentración. la existencia de gran actividad crat en testículo y en espermatozoides de d.Melanogaster ya había sido reportada con anterioridad, y se había relacionado la baja actividad crat con espermatozoides inmaduros y machos estériles, pero los enzimas responsables de esta actividad en la mosca de la fruta no habían sido caracterizados. en este trabajo se ha empleado d.Melanogaster con la finalidad de estudiar la relación de crat y la fertilidad, debido a que esta especie es uno de los organismos modelo más utilizados. los resultados de esta tesis muestran que d.Melanogaster tiene tres genes que codifican proteínas que presentan actividad crat, que se han denominado crat a, crat b y crat c. Se ha realizado un estudio bioinformático de su secuencia y una comparación estructural con las crats de mamífero. También se han caracterizado mediante la expresión en sistemas heterólogos de sus dominios catalíticos y determinación de sus parámetros cinéticos. Posteriormente, se ha estudiado su expresión génica y proteica en diferentes tejidos por rt-pcr, northern blot y western blot. la proteína crat b, a diferencia de crat a y crat c, tiene un tamaño que duplica el habitual en el resto de crats conocidas. Posee el dominio típico de las carnitina acetiltransferasas en su región c-terminal, y un dominio desconocido y desestructurado que constituye la región n-terminal, y que no presenta semejanza con ninguna proteína anteriormente estudiada. Para elucidar la función in vivo de crat b se han planteado experimentos que han permitido concluir que este enzima se expresa específicamente en las glándulas accesorias masculinas como proteína de secreción glicosilada, constituyéndose así en la primera crat extracelular conocida. También se ha demostrado que esta proteína es transferida durante el apareamiento a la hembra. Debido a la importancia de la carnitina en la fertilidad masculina, en este trabajo se discute el posible papel de crat b en la reproducción.
Datos académicos de la tesis doctoral «Caracterización molecular de las carnitina acetiltransferasas de drosophila melanogaster«
- Título de la tesis: Caracterización molecular de las carnitina acetiltransferasas de drosophila melanogaster
- Autor: Ma. Irene Vazquez Vazquez
- Universidad: Barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 22/06/2009
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Fausto Garcia Hegardt
- Tribunal
- Presidente del tribunal: florenci Serras rigalt
- mercedes Gracenea zugarramurdi (vocal)
- (vocal)
- (vocal)