Tesis doctoral de María Arantzazu Rodriguez Caballero
El estudio «ex vivo» de la respuesta inmunológica frente a un antígeno concreto (de origen tumoral o microbiano) se aborda en la actualidad mediante diferentes procedimientos analíticos que permiten la identificación, el recuento y caracterización de los linfocitos específicos de dicho antígeno. Estas técnicas pueden analizar a nivel fenotípico y molecular el receptor específico de antígeno de las células t (tcr), identificar los linfocitos t que se unen a un determinado complejo hla-péptido antigénico o determinar la respuesta funcional de las células t tras cultivo «in vitro» con el antígeno. Sin embargo, ninguna de ellas permite caracterizar a los linfocitos t que responden de forma específica al antígeno y cuantificar simultáneamente las citoquinas que éstos liberan para lograr una respuesta coordinada y eficaz. en este trabajo doctoral se ha desarrollado y validado un método de evaluación de la respuesta inmunológica que permite identificar y caracterizar las células activadas productoras de citoquinas y que, simultáneamente, permite cuantificar las citoquinas secretadas al medio extracelular. este nuevo método, desarrollado directamente en sangre periférica sometida a mínima manipulación para preservar las condiciones fisiológicas del medio, ha permitido detectar simultáneamente cambios cualitativos y cuantitativos de la respuesta inmunológica tanto frente a estímulos genéricos como antigénicos. La validación del método ha permitido monitorizar «in vitro» de forma rápida, objetiva y reproducible la respuesta celular t frente a antígenos víricos (citomegalovirus -cmv-) y frente a antígenos tumorales (inmunoglobulina (ig) clonal en pacientes con mieloma múltiple -mm-). La caracterización del modelo de cmv nos ha permitido asimismo identificar ciertas asociaciones entre el haplotipo de donantes sanos seropositivos y clones de células t que responden específicamente a cmv con un determinado tcr-víY. Por su parte, en el modelo de respuesta antitumoral, se ha evaluado la eficacia de vacunación con ig clonal y células dendríticas alogénicas en pacientes con mm. para poder completar en profundidad la caracterización molecular de las células t activadas, se ha desarrollado además un método que permita en un futuro la separación de células t específicas de antígeno a partir de muestras de gran volumen.
Datos académicos de la tesis doctoral «Desarrollo y aplicación de un sistema de análisis de la respuesta inmunológica basado en la cuantificación simultánea (en la misma medición) de la secreción de citoquinas y caracterización de las células secretoras«
- Título de la tesis: Desarrollo y aplicación de un sistema de análisis de la respuesta inmunológica basado en la cuantificación simultánea (en la misma medición) de la secreción de citoquinas y caracterización de las células secretoras
- Autor: María Arantzazu Rodriguez Caballero
- Universidad: Salamanca
- Fecha de lectura de la tesis: 17/11/2006
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- José Alberto Orfao De Matos Correia E Vale
- Tribunal
- Presidente del tribunal: maurizio Bendandi
- Miguel Cordero sanchez (vocal)
- candido Gardia de María (vocal)
- Francisco Ruiz-cabello osuna (vocal)