Tesis doctoral de Miriam De Las Mercedes Pedrera Mazarro
El objetivo de este trabajo fue caracterizar las lesiones y la distribución de antígeno en el ileón distal de teneros no encalostrados e inoculados con la cepa no citopática 7443 del virus de la diarrea bovina (dvb), y determinar la relación espacial y temporal entre la depleción linfoide, macrófagos expresando citoquinas, cambios cuantitativos y expresión de citoquinas por los linfocitos t, así como el papel de las células dendríticas. Para ello se tomaron muestran del ileón distal de 8 terneros no encalostrados que fueron sacrificados en grupos de os a los 3, 6, 9 y 14 días post-inoculación (dpl). 2 animales fueron empleados como controles. Las muestras fueron procesadas de forma rutinaria para su estudio histopatológico, inmunohistoquímico y ultraestructural. Para el estudio inmunohistoquímico se empleó la técnica de la avidina-biotina.Peroxidasa. La antígeno círico se evidenció con el anticuerpo monoclonal 15c5 (gp48). Distintos anticuerpos se emplearon para la identificación de las poblaciones macrofágicas (mac-398), linfocitos b (cd79, ki79), subpoblaciones de linfocitos t (cd3, cd4, cd8, wc1), células dendríticas (anti s100 y anti-cdf), células reticulares (anti-vimentina) y células productoras de citoquinas (tnf-a, il-6, ifn-? E il-4). Las células en apoptosis se estudiaron mediante el empleo de las técnicas de tunel y caspasa 3. Desde los 3 dpi se observó una progresiva depleción linfoide de las placas de peyer., Acompañado de un incremento de la apoptosis. Estos cambios se vieron acompañados del aumento de macrófagos fagocitando restos celulares a medida que avanzaba la experiencia. Desde los 3 dpi, el estudio inmunohistoquímico señaló a las células dendríticas y monocitos-macrófagos en los folículos linfoides, como las principales células blanco del virus, alcanzándose a los 9 dpi el máximo de células infectadas. La infección de los linfocitos fue escasa y de aparición tardía. Los resultados obtenidos sugieren que la acción directa del virus y de las citoquinas liberadas por los macrófagos en folículos y áreas interfoliculares, jugarían un papel secundario en la apoptosis linfocitaria. La infección vírica de las células dendríticas y reticulares induciría cambios morfológicos que podrían alterar los procesos de presentación de antígeno provocando la apoptosis de los linfocitos b. A pesar de la depleción linfoide, se produjo un incremento de linfocitos t activos (cd3+) desde los 3 dpi dentro de los folículos, principalmente cd4+ y desde los 6 dpi de cd8+ y gd. Se observó, desde los 3 dpi, un incremento significativo de il-4 frente a ifn?, Que se incrementó en fases finales de la experiencia, evidenciando una lteración de la respuesta th1/th2. Estos cambios producirían una lateración en la proliferación y transformación blástica de los linfocitos b, contribuyendo a su apoptosis masiva.
Datos académicos de la tesis doctoral «Caracterización de la respuesta inmune y estudio de los mecanismos de inmunosupresión en el intestino de terneros inoculados con el virus de la diarrea vírica bovina«
- Título de la tesis: Caracterización de la respuesta inmune y estudio de los mecanismos de inmunosupresión en el intestino de terneros inoculados con el virus de la diarrea vírica bovina
- Autor: Miriam De Las Mercedes Pedrera Mazarro
- Universidad: Córdoba
- Fecha de lectura de la tesis: 17/07/2008
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- José Carlos Gomez Villamandos
- Tribunal
- Presidente del tribunal: amador Jover moyano
- María belen Rodríguez sánchez (vocal)
- irene Greiser wilke (vocal)
- eduardo Ruiz villamor (vocal)