Tesis doctoral de José Javier De Vega Bartol
El gen ftf1 es un factor de transcripción específico de estirpes de fusarium oxysporum altamente virulentas. Está presente en múltiples copias generalmente asociado a transposones, como marsu (f. Oxysporum f. Sp. Phaseoli) e impala (f. Oxysporum f. Sp. Lycopersici). El número de copias de ftf1 es muy variable entre las distintas formas especiales (f. Sp.) E incluso entre aislados pertenecientes a la misma forma especial. Por ejemplo, al menos nueve copias de ftf1, localizadas en diferentes cromosomas, pueden encontrarse en el genoma secuenciado de f. Oxysporum f. Sp. lycopersici. La transcripción del gen ftf1 se activa drásticamente durante las etapas tempranas del proceso de infección en la planta hospedadora, como se demuestra mediante pcr cuantitativa en tiempo real, pero es baja y prácticamente invariable en el tiempo durante el crecimiento en cultivo líquido. con el objetivo de estudiar el papel de ftf1 en virulencia hemos caracterizado un nuevo grupo de estirpes de f. Oxysporum, originalmente aislados de plantas de judión (phaseolus coccineus). cuando se comparan con las estirpes de f. Oxysporum f. Sp. Phaseoli previamente descritas, las nuevas se comportan como super virulentas en ensayos de infección en plantas de judión. Las estirpes super virulentas tienen una copia extra del ftf1 y mayores niveles de transcripción in planta de ftf1 que las estirpes altamente virulentas. un gen muy similar a ftf1, denominado ftf2, pudo detectarse en una única copia en todas las estirpes de f. Oxysporum estudiadas, en otras especies del género fusarium y también en hongos filamentosos patógenos y no patógenos. El perfil de expresión de ftf2 durante la infección de plantas de judía es constante en el tiempo y similar al encontrado durante el crecimiento en medio líquido. No se encontró relación entre la expresión de ftf2 y la virulencia de las estirpes. se obtuvieron transformantes con la expresión de ftf1 y ftf2 alterada mediante silenciamiento mediado por rnai. El gen ftf2 parece importante para el crecimiento y la esporulación, pues los transformantes débilmente virulentos (que contienen una copia de ftf2 pero ninguna de ftf1) mostraron una reducción en la tasa de crecimiento en cultivo líquido. Sin embargo, no se observó ningún efecto en la patogenicidad o virulencia en ensayos de infección en planta. Por el contrario, ftf1 es un factor de virulencia en f. Oxysporum, pues los transformantes altamente y super virulentos silenciados en ftf1 mostraron una clara reducción de la virulencia, tanto usando judía como tomate como hospedador. Los resultados obtenidos demuestran que el silenciamiento de ftf1 no anula la patogenicidad pero reduce la virulencia sobre la planta hospedadora. para identificar los genes regulados por ftf2, se construyó una biblioteca ssh con arn aislado de una estirpe silvestre débilmente virulenta y un transformante silenciado en ftf2 derivado de ella, de forma que la biblioteca está enriquecida de genes regulados por ftf2. Los resultados obtenidos muestran claramente que ftf2 tiene un papel activador de la transcripción. Varios genes identificados como presuntamente regulados por ftf2 parecen involucrados en respuesta a estrés nutricional. la gran similitud entre los genes ftf1 y ftf2 pero su diferente papel en la infección del hospedador son interesantes para el estudio del origen y evolución de la patogenicidad y la especialización de f. Oxysporum.
Datos académicos de la tesis doctoral «Expresión de los genes ftf1 y ftf2 del hongo patógeno fusarium oxysporum«
- Título de la tesis: Expresión de los genes ftf1 y ftf2 del hongo patógeno fusarium oxysporum
- Autor: José Javier De Vega Bartol
- Universidad: Salamanca
- Fecha de lectura de la tesis: 16/06/2009
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- José María Díaz Mínguez
- Tribunal
- Presidente del tribunal: ernesto Pérez benito
- martijn Rep (vocal)
- rosa María Ruiz vazquez (vocal)
- Antonio Molina fernández (vocal)