Tesis doctoral de Escobedo Robles Juan Francisco
El aislamiento y la purificación de una enzima de un caldo de fermentación a escala industrial es una etapa básica en los proceso biotecnológicos y suponen el mayor coste de producción. Por este motivo, en la presente memoria de investigación se exponen los resultados obtenidos en la metodología desarrollada para la purificación e inmovilización de la enzima glucoamilasa i, así como del modelado cinético en su uso como biocatalizador inmovilizado. la producción de glucoamilasa por aspergiullus níger genera dos isoenzimas (gl y gii) que poseen distinta actividad. Además de eliminar todos los componentes del caldo de fermentación es necesaria la separación selectiva de ambas isoenzimas. Por ello y haciendo un exhaustivo estudio de la composición y estructura de ambas isoenzimas se realiza una purificación por adsorción de un lecho con un soporte de intercambio iónico usando como resina el intercambiado aniónico deae-toyopearl y en función de la pequeña diferencia de valores de puntos isoeléctricos de ambas isoformas se pone a punto un método basado en la influencia que ejercen las variables ph y fuerza iónica sobre la adsorción, así como las condiciones de operación que pueden afectar al conjunto del proceso (temperatura y caudal). previamente, se ha desarrollado un diseño de experimentos que permite optimizar la concentración mediante precipitación salina de la enzima glucoamilasa (gl y gii) permitiendo una mayor resolución y eficacia en la adsorción selectiva de la enzima deseada (gi) sobre la resina de intercambio iónico. las condiciones de adsorción de la isoenzima glucoamilasa i han sido tales que permiten una inmovilización óptima sobre el soporte asegurando la máxima actividad en la hidrólisis del sustrato y manteniendo la estabilidad a largo plazo. De esta forma se ha conseguido en una sola etapa aislar, purificar e inmovilizar la enzima glucoamilasa i de una forma selectiva, con máxima activ
Datos académicos de la tesis doctoral «Purificación e inmovilización de glucoamilasa por adsorción. aplicación como sistema catalítico en procesos industriales«
- Título de la tesis: Purificación e inmovilización de glucoamilasa por adsorción. aplicación como sistema catalítico en procesos industriales
- Autor: Escobedo Robles Juan Francisco
- Universidad: Complutense de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 26/11/2004
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Jose Aracil Mira
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Bautista santa cruz Luis fernando
- Fernando Fernández-polanco fernández-m (vocal)
- julio félix Tijero miquel (vocal)
- Javier Bilbao elorriaga (vocal)