Tesis doctoral de Aaron Cabrera Asensio
Los objetivos de esta tesis son: 1,- caracterización y purificación de enzimas que degradan diadenosina polifosfatos intracelularmente (ap3aasa y ap4aasa) y de ectoenzimas que los degradan extracelularmente. 2,- comparación de actividad ap3aasa citosólica humana con la proteína supresora de tumores fhit. para garantizar una caracterización exhaustiva de los enzimas investigados se utilizaron una amplia gama de técnicas: cromatografía convencional y hplc, electroforesis, ensayos de fluorescencia, ensayos enzimáticos, y diversos modelos experimentales: citosol de tejidos de rata, membranas de cerebro, cerebelo y sinaptosomas de rata, ovocitos de xenopus laevis y citosol de leucocitos y plaquetas humanos. Estos diferentes modelos permitieron la comparación de las características de los enzimas estudiados en diferentes organismos y sistemas. los ensayos de la actividad enzimática se realizaron con eteno derivados de diadenosona polifosfatos como sustratos fluorogénicos. Ello supone una gran simplificación sobre técnicas radiométricas y cromatográficas anteriormente en uso, y posibilita la valoración de la actividad ap3aasa en clínica mediante un sencillo, económico y rápido método fluorimétrico. los resultados indican que es imposible distinguer cinéticamente entre la actividad ap3aasa citosólica de plaquetas y leucocitos y la actividad ap3aasa de fhit, que la suramina es el inhibidor más potente descrito hasta el momento de la actividad ap3aasa y que el enzima ap3aasa presenta un masa molecular de 32 kda en condiciones nativas y de 17 kda en sds-page. se trata de la primera caracterización del enzima ap3a hidrolasa humano. el estudio comparativo entre el enzima ap3a hidrolasa y el supresor tumoral fhit ha revelado que ambas proteínas son idénticas o isoformas estrechamente relacionadas. Por primera vez se atribuye una función específica al enzima ap3a hidrolasa a pesar del tiempo transcurrido desde
Datos académicos de la tesis doctoral «Caracterización de los enzimas implicados en la regulación de la función señalizadora de los diadenosina polifosfatos«
- Título de la tesis: Caracterización de los enzimas implicados en la regulación de la función señalizadora de los diadenosina polifosfatos
- Autor: Aaron Cabrera Asensio
- Universidad: La laguna
- Fecha de lectura de la tesis: 06/11/2002
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Pedro Rotlllan Pascual
- Tribunal
- Presidente del tribunal: María teresa Miras portugal
- Corzo varillas Francisco Javier (vocal)
- Miguel ángel Falcón sanabria (vocal)
- enrique Castro lópez-tarruella (vocal)