Tesis doctoral de Alvaro Lafraya Aguado
Los fructooligosacáridos (fos) son oligosacáridos lineales de cadena corta, de creciente importancia biotecnológica debido a su función como prebióticos. Se designan como prebióticos a determinados ingredientes no digeribles de los alimentos que ejercen un efecto positivo para la salud porque estimulan selectivamente el crecimiento o el metabolismo en el colon de determinados microorganismos de acción beneficiosa. los fos pueden obtenerse por hidrólisis parcial de polisacáridos (inulina o levano) o por síntesis enzimática a partir de sacarosa. Frecuentemente, las glicohidrolasas son capaces de catalizar tanto la hidrólisis de un enlace glicosídico como su formación, y su actividad en uno u otro sentido depende en gran medida de la conformación del centro activo y de las condiciones ambientales en las que actúen. Esta dualidad permite el uso de enzimas hidrolíticas en reacciones biosintéticas. en este contexto, la presente tesis ha cumplido un doble objetivo: 1) la identificación y caracterización de una nueva especie de levadura, wickerhamomyces navarrensis, aislada de tierra asociada a raíces de plantas de ajo y cebolla, y que está dotada de una invertasa que es capaz de sintetizar fos a partir de sacarosa mediante transfructosilación. 2) la ingenierización y el estudio estructural y funcional de la invertasa suc2 de s. Cerevisiae, consiguiendo mutantes de ésta con una mayor capacidad transfructosilante. Algunos de esos mutantes incrementaron la síntesis de 6-kestosa hasta en 12 veces respecto a la enzima nativa, sin afectar a la síntesis de otros fos. Además, se ha identificado un residuo que modifica la especificidad de producto, ya que la enzima mutante sintetiza cantidades equimolares de 1-kestosa y 6-kestosa. Esto sugiere que el locus estructural ocupado por este residuo está involucrado en la orientación de la molécula aceptora y determina la especificidad de síntesis de enlaces íY(2-1) vs íY(2-6).
Datos académicos de la tesis doctoral «Análisis molecular, modificación funcional y producción de enzimas susceptibles de ser utilizadas en la síntesis de fructooligosacáridos«
- Título de la tesis: Análisis molecular, modificación funcional y producción de enzimas susceptibles de ser utilizadas en la síntesis de fructooligosacáridos
- Autor: Alvaro Lafraya Aguado
- Universidad: Universitat de valéncia (estudi general)
- Fecha de lectura de la tesis: 21/06/2011
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Julio Polaina Molina
- Tribunal
- Presidente del tribunal: guillermina Font pérez
- julia Sanz aparicio (vocal)
- vicente Monedero García (vocal)
- María Fernandez lobato (vocal)