Tesis doctoral de Raquel Díaz Martínez
Los cánceres de colon y mama son dos de las neoplasias más frecuentes en las sociedades occidentales, y llevan asociadas unas altas tasas de mortalidad. En este contexto, la identificación de marcadores moleculares que puedan ayudar bien a la detección temprana o bien a la predicción del comportamiento del tumor y su respuesta a la terapia es muy importante. Por lo tanto, el significado clínico de la alteración en los niveles de expresión de las isoformas de p73 en estos tipos tumorales es de particular interés, así como su regulación y su implicación en las distintas vías de la tumorogénesis. aunque las variantes que mantienen el dominio de transactivación de p73, tap73, presentan función supresora tumoral como p53 (otro miembro de esta familia), las formas que pierden el dominio de transactivación, ¿tap73, ejercen un efecto oncogénico inactivando las propiedades supresoras de tap73 y p53. Además de este papel, se ha descrito que todas las formas ¿tap73 inducen la fosforilación in vitro de la proteína supresora tumoral del retinoblastoma (prb), lo que conduce a la liberación de e2f. Es interesante que e2f-1 pueda activar la transcripción de p73 a través de sus sitios de unión, localizados en regiones no codificantes de los dos promotores de p73. también se ha descrito que la isoforma específica ¿p73 promueve inmortalización en células primarias y coopera con k-ras oncogénico en la inducción de su transformación in vivo. Con esta información intentamos caracterizar el perfil de expresión de estos genes en tumores humanos con el fin de evidenciar su papel en la carcinogénesis humana. La sobreexpresión observada de las isoformas de p73 en los tejidos tumorales y su asociación con parámetros patológicos de peor pronóstico apoyan claramente su implicación en el proceso tumorogénico de mama y colon. La correlación encontrada in vivo entre las variantes de p73, p53 y e2f-1 indican la existencia de una red funcional entre ellos que debe modular el contexto supresor u oncogénico celular. nuestra serie inicial de pacientes con cáncer de colon fue seguida una media de 70 meses con el fin de evaluar el impacto que los niveles de las isoformas de p73 ejercen en la supervivencia libre de enfermedad y global de los pacientes. adicionalmente se evaluó la asociación de genes diana de las variantes de p73 relacionados con procesos de quimio-resistencia (mdr1, hmg1 y caspasa-1) con la evolución de los pacientes. El hecho de que la sobreexpresión de ex2/3p73 y p73 se asocie con supervivencias globales más cortas indica su posible valor como marcador pronóstico, además de apoyar su papel oncogénico. La correlación observada entre las variantes ¿tap73 y hmg1 y mdr1 sugiere que estos podrían ser dianas de las isoformas de p73 in vivo. Además, hmg1 y mdr1 predicen con potencia estadística similar al estadio tumoral la supervivencia global de manera independiente, lo que indica la importancia de identificar efectores de p73 que podrían predecir la evolución de los pacientes de cáncer de colon mejor que las propias variantes ¿tap73. las isoformas de p73 podrían también modular el proceso angiogénico. Existen datos discordantes en la literatura al respecto. Hay distintos trabajos que apoyan tanto la regulación negativa como la positiva de vegf por p73. Con el fin de aclarar si las distintas variantes de p73 ejercen efectos contrarios sobre la expresión de vegf llevamos a cabo un estudio correlativo en nuestras series de pacientes. Además hemos evaluado si vegf165b y pedf, ambas con función anti-angiogénica podrían estar reguladas diferencialmente por las distintas isoformas de p73. Finalmente hemos evaluado si ciertas alteraciones oncogénicas, como mutaciones en p53, activación de kras y los niveles de e2f-1 podrían estar afectando a esta vía. Hemos observado una correlación directa entre los niveles de expresión de la distintas isoformas de p73 y vegf y vgf165b e inversa con pedf, lo que apoya su posible regulación por las variantes de p73. Este escenario se complica debido al mecanismo de retro-alimentación que puede existir entre pedf y vegf. Nuestros datos apoyan que vegf podría afectar los niveles de e2f-1, y/o viceversa. Mientras que las mutaciones en k-ras podrían regular negativamente la expresión de pedf, la sobreexpresión de vegf165b podría resultar de un mecanismo compensatorio ante la inactivación de p53. Nuestros resultados apoyan el papel de vegf165b como supresor tumoral y su posible valor como marcador pronóstico. debido a la relevancia que las isoformas de p73 pueden tener en la evolución de los pacientes con cáncer, consideramos de vital importancia identificar mecanismos o componentes que puedan regular sus niveles. En nuestro estudio hemos observado que 1,25(oh)2d3 regula negativamente a survivina y a las variantes de p73 en líneas celulares de colon y mama. También observamos una regulación positiva de todas las isoformas de p73 por survivina. Nuestros datos muestran que 1,25(oh)2d3 regula negativamente a las distintas isoformas de p73, esta modulación puede ser dependiente de survivina, aunque no podemos descartar una regulación de p73 por 1,25(oh)2d3 independiente de survivina. Los resultados analizando los niveles de epr1 (localizado en la misma región cromosómica que survivina pero en sentido opuesto) apoyan el papel de epr-1 como un posible anti-sentido natural de survivina y su posible papel como marcador de malignidad. Experimentos adicionales muestran que survivina regula la expresión de las isoformas de p73 a través de la modificación de marcas epigenéticas relacionadas con la actividad transcripcional. en resumen, los datos obtenidos apoyan la función oncogénica de las isoformas ¿tap73 en distintas etapas del proceso tumorogénico y su posible valor como marcadores moleculares de la evolución de los pacientes con cáncer de colon en el ámbito clínico. Finalmente distintos mecanismos y componentes podrían utilizarse para modular sus niveles en los pacientes, con el fin de afectar al pronóstico de los mismos.
Datos académicos de la tesis doctoral «Implicación y regulación de las isoformas de p73 en distintas etapas del proceso tumorogénico. valor pronóstico en pacientes con cáncer«
- Título de la tesis: Implicación y regulación de las isoformas de p73 en distintas etapas del proceso tumorogénico. valor pronóstico en pacientes con cáncer
- Autor: Raquel Díaz Martínez
- Universidad: Autónoma de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 21/02/2011
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Felix Bonilla Velasco
- Tribunal
- Presidente del tribunal: ramon Perez maestu
- Juan Martinez cortes (vocal)
- rocio Gonzalez urdinguio (vocal)
- Antonio Colmenarejo rubio (vocal)