Tesis doctoral de Pilar Veguillas Redondo
En el presente estudio se ha analizado el comportamiento del gen tsap6 en carcinomas colorrectales y su relación con la presencia en plasma de exosomas liberados por el tumor. Para ello, determinamos los niveles de arnm de tsap6 en los carcinomas y en tejidos normales de cada paciente y la presencia de exosomas en plasma. Además, teniendo en cuenta la asociación descrita entre p53, el gen tsap6 y los exosomas, también se ha examinado el estado de p53 en los tumores y su relación con los niveles de tsap6 en los mismos. Hemos analizado la relación de estas determinaciones, presencia de exosomas en plasma y niveles de arnm de tsap6 en los tumores, con una serie de parámetros clínico- patológicos de los tumores y con la supervivencia global y libre de enfermedad de los pacientes. el estudio se llevó a cabo en una serie amplia de pacientes con cáncer colorrectal, analizando el plasma y muestras de tejido tumoral y sano de cada paciente. Se aislaron exosomas del plasma y de los medios de cultivo celulares en una serie de experimentos in vitro, su cuantificación se realizó mediante citometría de flujo utilizando microesferas conjugadas con cd63. Se extrajo arnm de muestras de tejido tumoral y sano de cada paciente, asi como su adnc, mediante transcripción reversa. Hemos realizado un estudio paralelo in vitro en líneas con y sin p53, sometidas a daño celular con doxorrubicina, para estudiar la regulación de tsap6 por p53. se detectó una mayor liberación de exosomas en el plasma de pacientes respecto de los controles sanos de forma claramente significativa. Los niveles elevados de exosomas se correlacionaron estadísticamente con altos niveles de cea en plasma y con tumores poco diferenciados. Los pacientes con altos niveles de exosomas en plasma mostraron una clara tendencia a tener una supervivencia global más corta. El arnm de tsap6 se detectó en el 84,3% de nuestra serie de tumores; en esos tumores se encontraron niveles altos de arnm de tsap6 en un 14%, aunque su expresión no se asoció de forma significativa con la supervivencia ni con parámetros clínico-patológicos. No encontramos en nuestro estudio una asociación entre la expresión de arnm de tsap6 y los niveles de exosomas circulantes en plasma. Por técnicas de inmunohistoquímica el 63% de los tumores mostraron una marcada positividad para p53, pero no se observó relación entre la proteína p53, el gen tsap6 y los niveles de exosomas en plasma. En el estudio in vitro tampoco pudimos demostrar la regulación de p53 sobre tsap6. en conclusión los resultados de nuestro estudio sugieren que es posible detectar exosomas en el plasma de pacientes con cáncer colorrectal y que en aquellos pacientes con niveles más elevados hay una tendencia a supervivencias más cortas. No hemos podido demostrar en nuestro estudio una clara implicación de la vía p53/tsap6 en la liberación de exosomas.
Datos académicos de la tesis doctoral ««liberación de exosomas al plasma de pacientes con cáncer de colon. correlaciones pronósticas y regulación por la víap53/tsap6»«
- Título de la tesis: «liberación de exosomas al plasma de pacientes con cáncer de colon. correlaciones pronósticas y regulación por la víap53/tsap6»
- Autor: Pilar Veguillas Redondo
- Universidad: Autónoma de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 20/06/2011
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Francisco Javier Silva Leal
- Tribunal
- Presidente del tribunal: víctor Sánchez turrión
- José Miguel García ruiz (vocal)
- Jesús Cuevas santos (vocal)
- Juan pablo Martínez cortés (vocal)