Tesis doctoral de Pablo Alonso De La Vega
A partir de los resultados obtenidos en el aislamiento de bacterias de tipo micromonospora en el interior de nódulos, se puede afirmar que, como la presencia de estos microorganismos en los nódulos es inequívoca. El papel que las micromonósporas desempeñan es aún desconocido, esencialmente porque el descubrimiento de la relación es muy reciente. la distribución de micromonospora en los nódulos de lupinus parece ser muy irregular, concentrándose una gran cantidad de células viables en unos pocos nódulos. Por el contrario, las cepas de bradyrhizobium crecían de forma sistemática en todas las placas de aislamiento. la aproximación metagenómica para llevar a cabo estudios de diversidad bacteriana en nódulos, a través de la técnica de dgge, muestra numerosos inconvenientes técnicos, especialmente relacionados con la interferencia provocada por el adn proveniente de los cloroplastos de las células vegetales de los nódulos y la probable escasa abundancia de adn correspondiente a micromonospora. De este modo, los perfiles de bandas obtenidos mediante dgge son muy sencillos, y permiten solo la detección de estos dos «organismos» mayoritarios en la muestras. Sin embargo, sí se pudo detectar la presencia de micromonospora en el pool de adn metagenómico mediante la clonación del gen gyrb de micromonospora. la caracterización de las cepas aisladas se realizó empleando diversas técnicas de genotipado, secuenciación del gen arnr 16s, caracterización fisiológica y estimación del tamaño genómico. Los resultados obtenidos muestran claramente una gran diversidad entre las cepas aisladas. La especie que con mayor frecuencia se aísla es m. Saelicesensis. por otro lado, en este trabajo se describe por primera vez el aislamiento de varias cepas pertenecientes a los géneros actinomadura, microbispora y actinomadura, a partir de nódulos fijadores de nitrógeno de una leguminosa, en concreto de plantas del género lupinus. adicionalmente, se amplificó y secuenció, para varias de las cepas aisladas, el gen nifh, relacionado con la fijación de nitrógeno, presentando una elevada similitud con el mismo gen descrito para frankia alni. otro aspecto innovador del trabajo es el estudio microscópico, a nivel de ultraestructura, de la presencia de micromonospora en los nódulos, tratando de descubrir su ubicación y distribución en los mismos. De este modo, se describió que micromonospora actúa como un microorganismo endofito, encontrando sus células en la zona del cortex del nódulo.
Datos académicos de la tesis doctoral «Distribución, caracterización e importancia ecológica de micromonospora en nódulos fijadores de nitrógeno de lupinus«
- Título de la tesis: Distribución, caracterización e importancia ecológica de micromonospora en nódulos fijadores de nitrógeno de lupinus
- Autor: Pablo Alonso De La Vega
- Universidad: Salamanca
- Fecha de lectura de la tesis: 16/07/2010
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Martha Estela Trujillo Toledo
- Tribunal
- Presidente del tribunal: ramón Santamaría sánchez
- olga Genilloud rodríguez (vocal)
- José María no Igual arroyo (vocal)
- philippe joseph Normand (vocal)