Tesis doctoral de Sheyla Montori Pina
En los países industrializados, los accidentes cerebrovasculares (ictus) son la segunda causa de muerte e invalidez y su preValencia aumenta con la edad. A pesar de ello, la mayoría de los estudios experimentales se realizan en individuos jóvenes por lo que son necesarios más estudios para comprender cómo la edad modula la respuesta al ictus. La isquemia producida por el accidente cerebrovascular es seguida de un proceso de reperfusión al restablecerse el flujo sanguíneo durante el cual se ponen en marcha mecanismos que contribuyen al daño cerebral. Aparte de la prevención, los principales mecanismos susceptibles de ser usados como dianas terapéuticas son las moléculas implicadas en la excitotoxicidad y la respuesta inflamatoria provocadas por la isquemia-reperfusión. La excitotoxicidad está relacionada principalmente con la sobre-activación de los receptores glutamatérgicos, pero afecta a todo el sistema glutamatérgico, incluyendo a los transportadores de aminoácidos excitatorios (eaats). el objetivo de este estudio es analizar el papel de la edad en la respuesta a la isquemia cerebral, para lo que se utilizaron ratas sprague-dawley de 3 y 18 meses de edad en un modelo de isquemia global seguido de 48 horas de reperfusión, analizándose adicionalmente el efecto producido por el agente antiinflamatorio meloxicam. Para tener una medida de la actividad transcripcional y de la expresión de algunos de los genes implicados en la isquemia cerebral, se realizaron ensayos de pcr en tiempo real y de western blot. También se realizaron estudios de inmunohistoquímica para observar la muerte neuronal retrasada y la respuesta inflamatoria. tras el proceso de isquemia-reperfusión se observó un descenso muy significativo en la expresión de las subunidades nr1, nr2a y nr2b del receptor glutamatérgico de nmda en los animales de 3 meses y ese descenso se atenuó, o incluso se bloqueó, en los animales de 18 meses. El mismo efecto se observó para las subunidades glur1 y glur2 del receptor glutamatérgico de ampa. Por el contrario, la edad no atenuó la transcripción de la enzima adar2, responsable de la edición q/r de la subunidad glur2. Sin embargo, los eaats presentaron respuestas transcripcionales diferentes en función de su localización, neuronal o glial. En este sentido, el transportador glial glast mostró un incremento de su transcripción correlacionado con el aumento de la gliosis, mientras que el descenso de la transcripción del transportador neuronal eaac1 estuvo en concordancia con la muerte neuronal retrasada. La transcripción del transportador glt-1, que se expresa tanto en neuronas como en células gliales, descendió de un modo similar al observado para eaac1. La respuesta inflamatoria también se atenuó en los animales de 18 meses. El tratamiento con meloxicam dio lugar a una atenuación o bloqueo de la respuesta transcripcional a la isquemia en todos los genes estudiados, pero, curiosamente, se observó una menor supervivencia de los animales sometidos al daño isquémico. en este trabajo se concluye que la parada transcripcional de varios genes del sistema glutamatérgico actúa como un mecanismo protector frente al daño excitotóxico inducido por la isquemia-reperfusión. Este mecanismo sufre una atenuación dependiente de la edad que podría explicar la mayor mortalidad inducida por la isquemia, lo que se pone muy claramente de manifiesto en los animales 18 meses sometidos al tratamiento con meloxicam. La respuesta a la isquemia del transportador glt-1 parece ser más dependiente de cambios neuronales que gliales, a pesar del incremento de la gliosis. Las diferencias en los niveles de expresión y/o transcripción de algunos de los genes estudiados podrían explicar parcialmente la vulnerabilidad diferencial observada entre el hipocampo y la corteza cerebral, pero no explicarían la vulnerabilidad diferencial de las distintas áreas hipocampales. Nuestros datos apoyan la hipótesis de que existen cambios en la permeabilidad al calcio como respuesta a la isquemia-reperfusión, aunque estos cambios tampoco explican completamente la vulnerabilidad diferencial asociada a la edad o las diferentes áreas encefálicas.
Datos académicos de la tesis doctoral «Efecto de la edad y la inflamación sobre el sistema glutamatérgico en un modelo de isquemia cerebral en rata«
- Título de la tesis: Efecto de la edad y la inflamación sobre el sistema glutamatérgico en un modelo de isquemia cerebral en rata
- Autor: Sheyla Montori Pina
- Universidad: León
- Fecha de lectura de la tesis: 12/03/2010
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Beatriz Martínez Villayandre
- Tribunal
- Presidente del tribunal: pablo vicente Escribá ruiz
- diego Ruano caballero (vocal)
- christian Thode (vocal)
- domenico Pellegrini-giampietro (vocal)