Tesis doctoral de Alfonso Saera Vila
Los receptores de hormona de crecimiento (ghr) de peces se agrupan en dos grupos, las secuencias descritas en peces salmónidos y las descritas en peces no salmónidos. Las secuencias de peces no salmónidos presentan una gran conservación estructural con las secuencias de mamíferos, pero las secuencias de peces salmónidos muestran un bajo nivel de identidad aminoacídica con ausencia de un par de cisteínas extracelulares y un diferente patrón de tirosinas intracelulares. Ante esta situación se plantea la hipótesis de la existencia de dos formas alternativas para el gen ghr en los genomas de los peces: la forma de los peces no salmónidos (ghr-i) y la de los peces salmónidos (ghr-ii). A la luz de esta hipótesis se plantean los siguientes objetivos: 1) abordar la caracterización molecular y organización genómica de los ghr en peces teleósteos, 2) analizar su divergencia evolutiva, 3) analizar su patrón de regulación transcripcional en dorada y 4) definir su uso en dorada como biomarcadores de crecimiento y estrés por confinamiento y exposición a patógeno. para analizar la divergencia evolutiva, se diseñaron cebadores degenerados en base a las secuencias de salmónidos. Estos cebadores permitieron encontrar el ghr-ii en dorada, trucha y lubina. Las nuevas secuencias de ghr-ii presentan las mismas características estructurales que las secuencias de salmónidos y se agruparon con ellas al realizar un análisis filogenético. la caracterización molecular de ambos ghr en dorada mostró la misma organización genómica que el ghr de mamíferos con la salvedad de que no contienen un exón homólogo al 3 de mamíferos y de que el ghr-i tiene un intrón adicional en el exón 10. para analizar su regulación transcripcional, se midió la expresión de ambos ghr junto con la de igf-i e igf-ii bajo diferentes modelos experimentales. Los modelos estudiados fueron ayuno, estación, edad, infección por patógeno (enteromyxum leei) y estrés por confinamiento. De estas experiencias se deduce que la mayor de expresión de ambos ghr se da en hígado y que los cambios en la concentración de igf-i circulante son fiel reflejo de su expresión a nivel hepático. La expresión del ghr-i está altamente correlacionada con la expresión de igf-i e igf-ii en las experiencias de estación, edad e infección por patógeno. Sin embargo, en el modelo de estrés por confinamiento, la disminución de la expresión hepática de la igf-i e igf-ii refleja los cambios en la expresión del ghr-ii. Esto está en consonancia con los sitios de unión de factores de transcripción presentes en su región flanqueante. El modelo propuesto muestra una regulación diferencial de los ghr de dorada, aunque no se puede excluir un cierto solapamiento funcional con independencia de que sean promiscuos o específicos de la gh.
Datos académicos de la tesis doctoral «Duplicación, organización genómica y regulación transcripcional de los receptores de la hormona del crecimiento de peces. aspectos básicos y aplicados en dorada (sparus aurata)«
- Título de la tesis: Duplicación, organización genómica y regulación transcripcional de los receptores de la hormona del crecimiento de peces. aspectos básicos y aplicados en dorada (sparus aurata)
- Autor: Alfonso Saera Vila
- Universidad: Universitat de valéncia (estudi general)
- Fecha de lectura de la tesis: 13/11/2009
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Jaime Pérez Sánchez
- Tribunal
- Presidente del tribunal: silvia Zanuy doste
- Juan Miguel Mancera romero (vocal)
- María del mar Malagon poyato (vocal)
- lLuis Tort bardolet (vocal)