Tesis doctoral de Lissete Sánchez Magraner
La alfa-hemolisina es una toxina lítica producida pro cepas patogénicas de la bacteria e.Coli. Esta proteína está involucrada en diversas patologías como meningitis, speticemia, peritonitis o enfermedades del tracto urinario. en el presente trabajo se han estudiado las relaciones estrcutra-función tanto de la proteína nativa como de mutantes de sustitución y eliminación de residuos y dominios claves dentro de la proteína. para abordar este estudio se ha empleado una batería de técnicas bioquímicas, biofísicas y estructurales que nos ha permitido aclarar el papel de la región c-terminal de la proteína en la interacción con el calcio y las membranas. se ha determinado la afinidad por calcio del cominio c-terminal y se han determinado por espectroscopia de infrarrojo los cambios inducidos en el fragmento proteico por la unión al ligando. también se ha caracterizado la estabilidad del dominio c-terminal de la proteína en función de la concentración del ión ca2+. Se demuestra que el fragmento se encuentra totalmente desplegado en ausencia de ligando. De este comportamiento pueden extraerse importantes implicaciones funcionales de este grupo de toxinas. Sólo la especie saturada de calcio puede plegarse a una especie monomérica y estable. A diferencia de la proteína completa se observa una transición de plegamiento altamente cooperativa lo que demuestra que se trata de una unidad de plegamiento per ser. además se analizan otras variantes de la proteína completa, prestando especial atención al residuo his859, que resulta peculiar en los estudios de homología. Las propiedades tensoactivas de mutantes puntuales o dobles, así como la especie no acilada también se han analizado. en su conjunto el trabajo proporciona importantes claves sobre la función de la alfa-hemolisina. Además, los resultados obtenidos con el fragmento c-terminal abren importantes posibilidades para la cristalización del fragmento y la ulterior d
Datos académicos de la tesis doctoral «Relaciones estructura-función en la a-hemolisina de e.coli«
- Título de la tesis: Relaciones estructura-función en la a-hemolisina de e.coli
- Autor: Lissete Sánchez Magraner
- Universidad: País vasco/euskal herriko unibertsitatea
- Fecha de lectura de la tesis: 22/06/2007
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Ostolaza Etxabe Helena Amaia
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Rodríguez arrondo José Luis
- bruno Maggiio (vocal)
- Fernando De la cruz calahorra (vocal)
- laura Bakas (vocal)