Tesis doctoral de Susana Ubeda Tomas
En este trabajo se ha estudiado el papel de las gas en el desarrollo de las plantas de nerium oleander (adelfa), a través del estudio de los genes que codifican los enzimas implicados en el metabolismo de las gas. para ello, hemos aislado y caracterizado las secuencias de cdna y las secuencias genómicas de dos genes que codifican ga20oxidasas, enzimas implicados en la biosíntesis de las gas en adelfa (noga20oxl y noga20ox2) y las secuencias de tres genes (noga2oxl, noga2ox2 y noga2ox3), que codifican ga2oxidasas, enzimas responsables de la inactivación irreversible de las gas. los ensayos enzimáticos de las proteínas obtenidas tras la expresión heteróloga en escherichia coli de los clones de cdna aislados muestran que, las proteínas de fusión noga20ox1 y noga20ox2 convierten ga12 y ga53 en los productos ga9 y ga20 y, que la sproteínas noga2ox1, noga2ox2 y noga2ox3, convierten los substratos ga1, ga9 y ga20 en sus correspondientes productos 2beta-hidroxilados ga8, ga51 y ga29, respectivamente. Además, la noga2ox3 cataliza dos oxidaciones consecutivas sobre ga9 y ga20 rindiendo ga51-catabolito y ga29-catabolito, respectivamente, característica que le atribuye una naturaleza multifuncional a este enzima. Estos resultados demuestran que los clones de cdna noga20oxl y noga20ox2 codifican enzimas con actividad ga20oxidasa y, que los clones de cdna noga2oxl, noga2ox2 y noga2ox3 codifican enzimas con actividad ga2oxidasa, todos ellos enzimas funcionales in vitro. la transformación de nicotiana tabacum con el clon de cdna noga2ox3, bajo el control del promotor 35s, permite la expresión ectópica de este gen y la obtención de plantas de tabaco transgénicas, las cuales poseen un déficit en gas activas. Los bajos niveles de gas activas en las plantas transgénicas hace que distingamos dos tipos de fenotipos entre ellas: fenotipo enano (en las líneas l-40 y l-41) y fenotipo semienano (l-45.3, l-43.2 y l-46). Ambos fenotipos se d
Datos académicos de la tesis doctoral «Aislamiento de genes de la síntesis e inactivación de las giberelinas en adelfa y estudios de sus aplicaciones biotecnológicas«
- Título de la tesis: Aislamiento de genes de la síntesis e inactivación de las giberelinas en adelfa y estudios de sus aplicaciones biotecnológicas
- Autor: Susana Ubeda Tomas
- Universidad: Politécnica de Valencia
- Fecha de lectura de la tesis: 11/07/2003
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Isabel Lopez Diaz
- Tribunal
- Presidente del tribunal: vicente Conejero tomás
- esther Carrera bergua (vocal)
- Manuel Talón cubillo (vocal)
- Juan Carbonell gisbert (vocal)