Tesis doctoral de Mª Purificación Lison Parraga
Las plantas responden al ataque de insectos, herbívoros y a la herida activando una gran variedad de genes, entre ellos, los inhibidores de proteasas. estos inhibidores son capaces de inhibir actividades proteolíticas presentes en el tracto digestivo de los insectos, inhibiendo así su crecimiento y desarrollo. En nuestro laboratorio se observó que plantas de tomate de la variedad «rutgers» tratadas con jasmonato de metilo (hormona implicada en la respuesta a herida) acumulaban en sus hojas altos niveles de una proteína de 21 kda, a la que denominamos jip-21. Con el propósito de analizar el posible papel defensivo de esta proteína hemos llevado a cabo su caracterización molecular y bioquímica. Para ello, hemos purificado dicha proteína y hemos obtenido sus correspondientes anticuerpos. A continuación, mediante inmuno-rastreo, hemos aislado el clon de cdna, cuyo análisis de homología de secuencia indica una posible función de inhibidor de catepsina d. El estudio de la expresión de jip-21 mediante northern-blot muestra que el gen se induce exclusivamente en hojas heridas o tratadas con meja (jasmonato de metilo), tanto local como distalmente. Mediante rt-pcr hemos detectado niveles constitutivos de mensajero en las flores, el tallo y los frutos de plantas adultas, así como en las raíces de plántulas sumergidas en una solución de meja. Se ha obtenido la secuencia genómica completa y se ha visto que el gen no presenta intrones. La regulación de la secuencia promotora parece presentar una serie de singularidades que lo hacen incompatible con sistemas heterólogos, puesto que plantas transgénicas de arabidopsis thaliana y de tabaco, a las que se ha introducido el gen jip-21 completo, no producen el patrón de expresión observado en la especie nativa. Asimismo, se han obtenido plantas transgénicas de tomate portadoras del cdna bajo el control transcripcional del promotor dobel 35s2x del camv. Estas plantas muestran altos niv
Datos académicos de la tesis doctoral «Caracterización molecular y bioquímica de una proteína de defensa inducible por herida en plantas de tomate«
- Título de la tesis: Caracterización molecular y bioquímica de una proteína de defensa inducible por herida en plantas de tomate
- Autor: Mª Purificación Lison Parraga
- Universidad: Politécnica de Valencia
- Fecha de lectura de la tesis: 15/07/2003
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Ismael Rodrigo Bravo
- Tribunal
- Presidente del tribunal: pilar Carbonero zalduegui
- ramón Serrano salom (vocal)
- ricardo Flores pedauye (vocal)
- carmen Castresana fernandez (vocal)