Tesis doctoral de Judit Bassols Casadevall
En este trabajo se han desarrollado dos métodos simples y rápidos para el cultivo de las células epiteliales de las tres regiones del epidídimo de sus domesticus. Uno se basa en el cultivo de fragmentos del túbulo epididimario intactos durante 8 días. El otro método se basa en el cultivo de fragmentos del túbulo epididimario digeridos con colagenasa que, después de 7 días, dan lugar a la formación de una monocapa de células epiteliales epididimarias que adquieren el 90-100% de confluencia tras 12-16 días en cultivo. Estas células se mantienen viables durante más de 60 días en cultivo y no se observa proliferación de células no epiteliales. para determinar el nivel de conservación de las características epididimarias en los cultivos se ha analizado la estructura celular, la actividad de síntesis y secreción proteica, y el mantenimiento y maduración de los espermatozoides en cocultivo. los resultados demuestran que los fragmentos epididimarios intactos mantienen la estructura y el mismo patrón específico de secreción del epitelio epididimario in vivo durante 2-4 días en cultivo. los fragmentos epididimarios digeridos con colagenasa presentan unas características similares a los fragmentos epididimarios intactos, pero la disgregación del epitelio para la formación de la monocapa celular provoca una rápida pérdida de la especificidad epididimaria. Durante los primeros 4 días de cultivo, los fragmentos del corpus epididimario digeridos con colagenasa promueven la migración de la gota citoplasmática en los espermatozoides inmaduros después de 24 horas de incubación. Esto indica que durante este tiempo se mantienen las características fisiológicas del túbulo epididimario. las células epiteliales del caput, corpus y cauda epididimario en monocapa pierden la estructura propia del epitelio epididimario in vivo, pero mantienen muchas de sus características morfológicas como son la presencia de estereocilios apicales, uniones int
Datos académicos de la tesis doctoral «Cultiu de les cél.lules epitelials epididimÁ ries de sus domesticus: anÁ lisi estructural, funcional i proteómic«
- Título de la tesis: Cultiu de les cél.lules epitelials epididimÁ ries de sus domesticus: anÁ lisi estructural, funcional i proteómic
- Autor: Judit Bassols Casadevall
- Universidad: Girona
- Fecha de lectura de la tesis: 21/06/2006
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Sergi Bonet Marull
- Tribunal
- Presidente del tribunal: merce Durfort coll
- José álvaro Cebrián pérez (vocal)
- Emilio Martínez García (vocal)
- García marín luís j (vocal)