Tesis doctoral de Caparrós Martín José Antonio
Hemos aislado dos genes de arabidopsis thaliana, atgpp1 y atgpp2, por homología con las fosfatasas de levadura de bajo peso molecular gpp1 y gpp2, las cuáles muestran especificidad por dl-glicerol-3-fosfato, y además comparten homología con dog1 y dog2 que defosforilan 2-deoxiglucosa-6-fosfato. Usando una aproximación de genómica comparativa, los genes se identificaron como putativas proteinas hidrolasas similares a las dehalogenasas haloácidas. Atgpp1 (gi 18416631) y atgpp2 (gi 18423981), codifican proteínas que comparten un 95% de identidad, con una mw predecida de 33 y 27 kda y un pi de 7.8 y 5.6 respectivamente. Ambas isoformas tienen alta especificidad por dl-glicerol-3-fosfato, ph óptimo a 7.0, y una km en el rango de 3.5-5.2 mm. Atgpp1 y atgpp2 se expresan a lo largo del desarrollo en todos los órganos de la planta, mayormente en silicuas, y la expresión no se ve afectada por estrés osmótico, iónico u oxidativo. Unido al extremo n-terminal de atgpp1 existe un putativo péptido de tránsito al cloroplasto ctp, atgpp2 que carece de esta señal se predice como citosólica; esta compartimentación fué confirmada mediante un fraccionamiento subcelular. El estudio de localización inmunohistoquímica, usando anticuerpos anti-atgpp2, indica que las proteínas atgpp están principalmente localizadas en los meristemos de flores inmaduras y en los elementos vasculares de la raíz, el tallo, las hojas, las silícuas y el embrión en desarrollo, concretamente en el citosol al igual que en los cloroplastos de distintos tipos celulares de arabidopsis, siendo llamativa la particular localización en las células acompañantes del tejido floemático. Las plantas transgénicas de arabidopsis, que sobreexpresan atgpp2, presentan una actividad fosfatasa alterada y una tolerancia mejorada al estrés salino, osmótico y oxidativo.
Datos académicos de la tesis doctoral «Identificación y caracterización molecular de nuevos genes del metabolismo del glicerol en plantas«
- Título de la tesis: Identificación y caracterización molecular de nuevos genes del metabolismo del glicerol en plantas
- Autor: Caparrós Martín José Antonio
- Universidad: Politécnica de Valencia
- Fecha de lectura de la tesis: 24/11/2006
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Francisco Culiañez Macia
- Tribunal
- Presidente del tribunal: montserrat Pages torrens
- Francisco Montero riquelme (vocal)
- antoni Fernández tiburcio (vocal)
- olga Botella miralles (vocal)