Aproximación a la fisiopatología de la retinopatíadabética.estudio de la fosorilación y nitrosilación de tirosinas de proteinas y péptidos inflamatorios y angiogénicos del humor vítreo

Tesis doctoral de Jeroni Nadal Reus

Las tirosinas fosforiladas son reconocidas por vincular dominios especializados con otras proteínas y dichas interacciones se utilizan para iniciar vías de señalización intracelular, así la evaluación del grado de fosforilación de proteína podría proporcionar información importante en la retinopatía diabética que suele asociarse con una disminución general en el estado de fosforilación de tirosina y de elementos inflamatorios en el líquido vítreo. en los últimos años, el desarrollo de la tecnología de proteomica ha abierto un nuevo enfoque para estudiar las complicaciones diabéticas microvasculares y muchos péptidos y proteínas han surgido como mediadores putativos del daño vascular , sin embargo, las alteraciones en la expresión de proteínas o cantidades de las mismas observado en estos estudios no implican un papel mecanicista y pueden ser una causa más bien que una consecuencia de la lesión endotelial. La fosforilación de tirosina es un mecanismo generalizado subyacente a la acción de una amplia gama de receptores de membrana diferentes, incluyendo las interlequinas, 17, 18 tnf, 19 igf ii, 20 o vegf. en la actualidad, solo podemos especular sobre el papel de fosforilación de tirosina en modulación de, por ejemplo, la acción de la interleuquina . Sin embargo, los cambios relacionados con la diabetes observados en el estado de fosforilación de los péptidos analizados en nuestros estudios pueden ser importantes desde un punto de visto clínico y de investigación, independientemente de su importancia biológica específica. Cabe señalar que la disminución observada en la fosforilación de tirosina global de los péptidos estudiada no se asoció con cambios significativos en el contenido total de proteínas de la mayoría de las proteínas evaluadas. Sin embargo, los resultados publicados por otros autores indican que la retinopatía diabética puede estar asociada con cambios en el contenido total de muchos de los péptidos analizados en el humor vítreo, como proteína inducida por el interferón ip -10; mcp-1; vegf; tnf; il-1, -6 y -8; y aun de la leptina. Una posible explicación de estas diferencias podrían estar relacionados con el hecho de que nuestro estudio se realizó mediante tecnología de laboratorio que puede detectar pequeños cambios en el contenido de proteína total que los utilizados por las obras se informó anteriormente y por la potencia estadística del número de muestras. Sin embargo, se señaló que, a pesar de estas deficiencias, se detectó una disminución general del estado de fosforilación de tirosina. Desde un punto de vista práctico, estos resultados demuestran que se pueden detectar cambios en el estado de fosforilación de tirosina de estos péptidos incluso en las condiciones en que no hay cambios en el contenido de proteína total , así, dando un nuevo enfoque para detectar alteraciones funcionales de los componentes de humor vítreo que pueden detectarse en las condiciones en que las variaciones de contenido de proteína total no se aprecian. Estos resultados indican que un biomarcador sensible de la presencia de alteraciones oculares relacionados con retinopatía diabética conducen a una discusión de la probable causa de que los péptidos analizados demuestran una disminución en su condición de fosforilación de tirosina en péptidos del humor vítreo. en vista de los datos, hay al menos dos explicaciones hipotéticas. La primera sería un fallo relacionado con la diabetes en los mecanismos de fosfodefosforilación en las células que sintetizan y segregan estos péptidos. La fosfodefosforilación de residuos de tirosina es un fenómeno postranscriptional, que siempre se realiza a través de una batería de todas las diferentes proteínas quinasas y fosfatasas bajo una base intracelular ,la presencia de cambios en el estado de fosforilación de tirosina de péptidos presentes en un entorno extracelular, tales como el humor vítreo, indicaría que existe alguna alteración en el funcionamiento de estas proteínas quinasas y fosfatasas que se produce en las células capaces de producir y secretar los péptidos analizados. De hecho, ya ha descrito una relación entre la diabetes y alteración de los mecanismos fosfodefosforilación en rutas metabólicas. Por lo tanto, es bien sabido que la diabetes no tan solo altera la actividad basal, sino también a la insulina estimulando la activación de varios quinasas tirosina importante como akt y quinasa de glucógeno sintasa (gsk).Estas alteraciones inducen concomitantes modificaciones en el funcionamiento normal de la mayoría de las rutas metabólicas controladas por estas quinasas. Otra posible explicación para la disminución observada en estado de fosforilación de tirosina es la reducción de residuos fosforiladas por nitrificación, relacionadas con el exceso bien documentado de peroxinitritos en el ojo con retinopatía diabética.En este sentido, se ha descrito que la diabetes provoca degeneración retiniana a través de una inhibición mediada por peroxinitrito en la señalización del factor de crecimiento nervioso (ngf).Este efecto es mediado por una disminución fosforilación del receptor de quinasa tirosina ngf, que impide el normal de la señalización de ngf en la retina ; así, la reducción en la fosforilación de tirosina observada podría ser la consecuencia de la presencia de altos niveles de superóxido radicales y peroxinitritos, que afectan a la señalización final de estos péptidos foforiladosen en sus lugares de destino. Nuestro estudio no fue diseñado para investigar los mecanismos fisiopatológicos de la proteína fosfodefosforilación, porque no sabíamos el estado de fosforilación de las proteínas en el vítreo de los pacinetes conretinopatía diabética de antemano. Futuros experimentos están destinados a abordar esta cuestión.

 

Datos académicos de la tesis doctoral «Aproximación a la fisiopatología de la retinopatíadabética.estudio de la fosorilación y nitrosilación de tirosinas de proteinas y péptidos inflamatorios y angiogénicos del humor vítreo«

  • Título de la tesis:  Aproximación a la fisiopatología de la retinopatíadabética.estudio de la fosorilación y nitrosilación de tirosinas de proteinas y péptidos inflamatorios y angiogénicos del humor vítreo
  • Autor:  Jeroni Nadal Reus
  • Universidad:  Autónoma de barcelona
  • Fecha de lectura de la tesis:  11/11/2011

 

Dirección y tribunal

  • Director de la tesis
    • Jorge Luis Reverter Calatayud
  • Tribunal
    • Presidente del tribunal: jose Garcia arumi
    • daniel Vilaplana blanch (vocal)
    • (vocal)
    • (vocal)

 

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