Tesis doctoral de Patricia González Bulnes
La presente tesis doctoral se ha centrado, como su título indica, en la síntesis y evaluación biológica de miméticos de fosfolípidos. Los fosfolípidos son importantes moléculas en la célula. Debido a su carácter anfipático son componentes esenciales de las membranas celulares y están implicados en la generación de mensajero secundarios como diacilgliceron (dag), inositol trifosfato o ácido araquidónico entre otros. La fosfolipasa c específica de fosfatidilcolina (pc-plc) está implicada en la generación sostenida de dag necesaria para procesos tales como la diferenciación celular y el crecimiento. Sin embargo, la pc-plc de mamíferos aún no ha sido aislada o clonada, por esa razón se usan plc de origen bacteriano como la pc-plc de bacillus cereus como modelos. En nuestro de trabajo se habían obtenido previamente inhibidores de pc-plcbc. Nuestro objetivo inicial fue la modificación de dichos inhibidores intentando mejorar la interacción con el centro activo del enzima y la actividad inhibidora. Respecto a la activación inhibidora, en dos casos si que logramos activar con compuestos que antes no la tenían, pero para el resto de los compuestos, 10 en total, los resultados fueron similares a los obtenidos anteriormente. En el caso de la interacción con el centro activo del enzima si logramos que estos compuestos interaccionaran con el enzima. De los tres compuestos elegidos para estudiar el tipo de inhibición, dos resultaron ser inhibidores de tipo mixto, comportándose como inhibidores acompetitivos a baja concentración de substrato y como inhibidores competitivos a concentraciones elevadas de sustrato. Clostridium perfringens, el parásito que causa la gangrena gaseosa, produce una toxina determinante para la virulencia de la enfermedad y que posee actividad fosfolipasa c. La gran similaridad estructural existente entre ambos enzimas nos hizo estudiar el efecto de los ácidos aminohidroxámicos sintetizados sobre la fosfolipasa c de clostridium perfringens. De los tres compuestos elegidos sólo uno logró inhibir dicho enzima y resultó ser un inhibidor más débil que en el caso de pc-plcbc. la publicación en 2002 de un artículo por parte de hanada y col. En el que se proponía la fosfolipasa c de plasmodium falciparum como una buena diana para la síntesis de fármacos antimaláricos nos hizo estudiar el efecto de los ácidos hidroxámicos obtenidos sobre plasmodium falciparum. Los ensayos hechos con los dos inhibidores más potentes del crecimiento del parásito mostraron que bloquean la segunda etapa del desarrollo intraeritrocítico del parásito, la etapa de trofozoíto. Dichos compuestos inhiben asímismo la síntesis de fosfatidilcolina, el fosfolípido mayoritario de plasmodium falciparum y es probable que inhiban la entrada de colina aunque ellos entran en el parásito por un mecanismo independiente. finalmente nos centramos en la síntesis de análogos de fosfatidilinositol como inhibidores de la inositolfosforilceramida sintasa (ipcs) un enzima esencial para la viabilidad de los hongos. El aumento de la población inmunosuprimida, ya sea debido al sida, a la quimioterapia o a los trasplantes de órganos está aumentando la peligrosidad de las infecciones fúngicas. La ipcs ofrece una diana terapéutica ideal por dos razones: una es que no hay equivalente en mamíferos para este enzima, la otra es que el paso que cataliza es esencial para el hongo. Los inhibidores diseñados mantuvieron la cabeza polar del sustrato natural, sustituímos el grupo fosfato por un grupo carbonilo cuya posición variamos para las diferentes familias y simplificamos las cadenas alquílicas. También obtuvimos una familia de compuestos en los que la cabeza polar era un alcohol sencillo en lugar del myo-inositol. Tras la síntesis de estas familias procedimos al estudio preliminar de la actividad sobre ipcs y comprobamos que ninguno inhibía dicho enzima. Estos resultados indican que, probablemente, el grupo fosfato es esencial para la interacción con el centro activo del enzima. Las cadenas alquílicas simplificadas de los análogos también pueden contribuir a esta falta de reconocimiento por parte el enzima.
Datos académicos de la tesis doctoral «Synthesis and biological activity of phospholipid mimetics«
- Título de la tesis: Synthesis and biological activity of phospholipid mimetics
- Autor: Patricia González Bulnes
- Universidad: Barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 17/12/2007
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Amadeu Llebaria Soldevila
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Antonio Planas sauter
- rodolfo Lavilla grifols (vocal)
- choukri Ben mamoun (vocal)
- Carlos Puig durán (vocal)