Tesis doctoral de Garcia Nieto Hernaiz Rosa M.
La membrana plasmática de hígado de rata contiene cinco glicopolipeptidos que se adenililan y se fosforilan en residuos de treonina al utilizar atp como sustrato. Por otra parte, la membrana plasmática de células del hepatocarcinoma de rata as-30d contiene tres glicopolipeptidos de pesos moleculares similares que también se adenililan en treonina utilizando atp como sustrato; una de ellos, además, se fosforila. Hemos aislado, mediante cromatografía de afinidad en atp-agarosa, un dimero gp120-gp110 de hígado de rata y una glicoproteína de 115 kda (gp115) de células tumorales as-30d. ambas proteínas se autoadenililan y se autofosforilan. La adenililación corresponde a la formación de la intermediarios catalíticos durante la hidrolisis enzimática del atp. Las dos proteínas aisladas presentan actividades 5-fosfodiestenasa y nucleotidos pirofosfatasa (5-pde y nppasa) alcalinas y dependientes de cationes divalentes, pues son inhibidas por edta. Ambas actividades son estimuladas por iones zn cuando se ensayan en un tampon glicina-naoh; esta activación no se observa en un tampon tris-hc1. La expresión y/o las actividades -pde/nppasa de la gp115 de células turmorales as-30d son considerablemente menores que las del dimero gp120-gp110 de hígado de rata. además, la proteína de hígado de rata normal y la proteína de células tumorales tienen distinta afinidad por sus sustratos. Hemos identificado el dimero gp120-gp110 como la proteína pc-1, una ecto-5-fosfodiesterasa que forma un intermediario adenililado durante su ciclo catalítico. Hasta la fecha, se ha descrito que la proteína pc-1 está formada por dos subunidades idénticas; sin embargo, solo la gp120 del dímero de hígado de rata es reconocida por un anticuerpo monoclonal contral el c-terminal de la pc-1 humana, lo que indica que las dos subunidades difieren en esta región. por otro lado, la gp115 de células tumorales as-30d no forma dímeros y no es
Datos académicos de la tesis doctoral «Aislamiento y estudio comparativo de dos 5-fosfodiesterasas/nucleotido pirofosfatasas de la membrana plasmatica de higado de rata y de celulas del hepatocarcinoma de rata as-30d.«
- Título de la tesis: Aislamiento y estudio comparativo de dos 5-fosfodiesterasas/nucleotido pirofosfatasas de la membrana plasmatica de higado de rata y de celulas del hepatocarcinoma de rata as-30d.
- Autor: Garcia Nieto Hernaiz Rosa M.
- Universidad: Autónoma de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 01/01/1999
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Antonio Villalobo Polo
- Tribunal
- Presidente del tribunal: María teresa Miras portugal
- Fernandez de heredia adamez claudio (vocal)
- María antonia Lizarbe iracheta (vocal)
- Vamaselle viñas José Carlos (vocal)