Tesis doctoral de Roa Arranz Ana M.
Se han estudiado las bases moleculares implicadas en determinar la especificidad de sustrato de la pga de kluyvera citrophila. Asi, se han obtenido mutantes con diferente especificidad de sustrato, mediante un proceso de presion selectiva, siendo localizados los residuos aminoacidicos responsables. La comparacion de la secuencia de esta enzima con otras de la misma familia ha permitido realizar el diseño teorico de potenciales residuos estructural o funcionalmente importantes. por otra parte, se ha investigado la posibilidad de emplear sustratos a los descritos clasicamente, determinando la capacidad de la pga de hidrolizar esteres de fenol. Este hecho ha permitido realizar el estudio cinetico en el estado pre-estacionario, de la pga nativa y de la mutante adl, caracterizando el intermedio covalente acilenzima que se forma durante el proceso de catalisis. asimismo, se ha llevado a cabo un estudio de la regulacion y expresion del gen pac que codifica por la pga. Con este objetivo, se ha analizado el control que ejercen sobre la actividad pga diferentes factores, tales como: la temperatura, la represion catabolica y la induccion por acido fenilacetico, a nivel de transcripcion y postraducional. Se ha identificado el promotor y demas elementos que participan en la regulacion de la expresion del gen pac de k. Citrophila, y se han comparado con los responsables de controlar la expresion del gen pac de escherichia coli.
Datos académicos de la tesis doctoral «Aplicacion de nuevas estrategias bioquimicas y geneticas al estudio de la penicilina g acilasa de kluyvera citrophila.«
- Título de la tesis: Aplicacion de nuevas estrategias bioquimicas y geneticas al estudio de la penicilina g acilasa de kluyvera citrophila.
- Autor: Roa Arranz Ana M.
- Universidad: Complutense de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 01/01/1995
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Carmen Acebal Sarabia
- Tribunal
- Presidente del tribunal: José Martínez Peinado
- Francisco Salto Maldonado (vocal)
- Pilar Castillon Borreguero (vocal)
- Peñalva Soto Miguel Angel (vocal)